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?分步实验目标简易操作、结果、分析PCR鉴定正向重组质粒Y-M①选择图Ⅱ引物????;②PCR目的产物约为????????bp确保M及连接处序列正确③质粒测序,图Ⅲ中正确的是????(选填序列编号)检测融合蛋白定位④对照质粒Y-GFP(仅表达GFP)与实验质粒Y-M
分别导入细胞,发现对照组整个细胞均有绿色荧光
而实验组荧光集中在纤毛基部,说明????????(4)为研究另一纤毛病相关基因Z表达的变化,采用荧光定量PCR法检测健康人与病人
基因Z的转录水平。采集样本、提取总RNA,经????形成cDNA作为模板,PCR扩
增结果显示,在总cDNA模板量相等的条件下,健康人Ct值为15,而病人Ct值为20(Ct值
是产物荧光强度达到设定阈值时的PCR循环数)。从理论上估算,在PCR扩增20个循环
的产物中,健康人样品的目的产物大约是病人的????倍。答案????(1)脂质和蛋白质发出星射线,形成纺锤体????(2)溶解DNA耐高温的DNA聚
合酶3????(3)①a、b②1100③Q4④纤毛基部可能含有与X蛋白特异性结合的
物质(受体)????(4)逆转录32考点4基因工程的应用及蛋白质工程17.(2023辽宁,8,2分)CD163蛋白是PRRSV(病毒)感染家畜的受体。为实时监控CD163
蛋白的表达和转运过程,将红色荧光蛋白RFP基因与CD163基因拼接在一起(如图),使
其表达成一条多肽。该拼接过程的关键步骤是除去?(????)?A.CD163基因中编码起始密码子的序列B.CD163基因中编码终止密码子的序列C.RFP基因中编码起始密码子的序列D.RFP基因中编码终止密码子的序列B18.(2021辽宁,14,2分)腈水合酶(N0)广泛应用于环境保护和医药原料生产等领域,但不
耐高温,利用蛋白质工程技术在N0的α和β亚基之间加入一段连接肽,可获得热稳定的
融合型腈水合酶(N1)。下列有关叙述错误的是(????)A.N1与N0氨基酸序列的差异是影响其热稳定性的原因之一B.加入连接肽需要通过改造基因实现C.获得N1的过程需要进行转录和翻译D.检测N1的活性时先将N1与底物充分混合,再置于高温环境??D19.(2020山东,25,11分)水稻胚乳中含直链淀粉和支链淀粉,直链淀粉所占比例越小糯
性越强。科研人员将能表达出基因编辑系统的DNA序列转入水稻,实现了对直链淀粉
合成酶基因(Wx基因)启动子序列的定点编辑,从而获得了3个突变品系。(1)将能表达出基因编辑系统的DNA序列插入Ti质粒构建重组载体时,所需的酶是????
????,重组载体进入水稻细胞并在细胞内维持稳定和表达的过
程称为????。(2)根据启动子的作用推测,Wx基因启动子序列的改变影响了????
????,从而改变了Wx基因的转录水平。与野生型水稻相比,3个突变品系中Wx
基因控制合成的直链淀粉合成酶的氨基酸序列????(填:“发生”或“不发生”)改变,原因是?????。(3)为检测启动子变化对Wx基因表达的影响,科研人员需要检测Wx基因转录产生的
mRNA(WxmRNA)的量。检测时分别提取各品系胚乳中的总RNA,经????过程获
得总cDNA。通过PCR技术可在总cDNA中专一性地扩增出Wx基因的cDNA,原因是????????。(4)各品系WxmRNA量的检测结果如图所示,据图推测糯性最强的品系为????,原
因是????。答案????(除注明外,每空1分)(1)限制性核酸内切酶(限制性内切核酸酶)和DNA连接酶????
转化????(2)RNA聚合酶与启动子的识别和结合不发生编码直链淀粉合成酶的碱基
序列中不含启动子????(3)逆转录(或反转录)引物是根据Wx基因的一段已知序列设计合成的(或引物能与Wx基因的cDNA特异性结合)(2分)????(4)品系3品系3的WxmRNA
量最少,控制合成的直链淀粉合成酶最少,直链淀粉合成量最少,糯性最强(2分)20.(新情境)(2023海南,20,13分)基因递送是植物遗传改良的重要技术之一,我国多个实
验室合作开发了一种新型基因递送系统(切—浸—生芽Cut-Dip-Budding,简称CDB
法)。图1与图2分别是利用常规转化法和CDB法在某植物中递送基因的示意图。回答下列问题。(1)图1中,从外植体转变成愈伤组织的过程属于????;从愈伤组织到幼苗的培养过程需要的激素有生长素和????
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