抗生素微生物检定法操作规程..pdf

西安利君精华药业有限责任公司GMP管理文件

题目抗生素微生物检定法操作规程共15页

文件编码JH—CZ—ZL—113—R02第1页

制定审核批准

制定日期审核日期批准日期

颁发部门公司办颁发数量3生效日期

分发单位质检室、质量管理部、质量副总

1、目的：利用抗生素在琼脂培养基内的扩散作用，比较标准品与供

试品两者对接种的试验菌产生抑制圈的大小，以测定供试品效价。

2、范围：用于本公司生产的抗生素类产品成品的含量测定。

3、责任：质检员执行，质检室主任检查，质量管理部监督。

4、内容：

4.1管碟法为国际通用的方法，我国药典抗生素微生物检定法也一直

采用管碟法。

抗生素管碟测定法是利用抗生素在摊布特定试验菌的固体培养基内

呈球面形扩散，形成含一定浓度抗生素球形区，抑制了试验菌的繁殖

而呈现出透明的抑菌圈。此法系根据抗生素在一定浓度范围内。对数

剂量与抑菌圈直径（面积）呈线性关系。通过比较标准品与供试品产

生抑菌圈的大小，计算出供试品的效价，抗生素效价以“单位（u）”

或“微克（ug）”表示。

4.2仪器与用具:

4.2.1操作室：光线明亮，操作室应分为两部分。彼此分开；一部分

为一般操作间，一部分为半无菌操作间。半无菌操作间，设有紫外线

灯达到空气消毒。应装有空调设备，控制室温在２０~２５℃。操作

题目抗生素微生物检定法操作规程共15页

文件编码JH—CZ—ZL—113—R02第2页

台可用稳固的水泥台，台面用玻璃板垫平，用水平仪校准，保持水平。

室内注意抗生素的污染。

4.2.2双碟：为硬质玻璃或塑料培养平皿，内径约90ｍｍ，高16～

17ｍｍ，碟底厚均匀水平，无气泡。碟底平度检查，可将双碟放在水

平台上，下垫一张白纸，碟内加水２～３ｍｌ，再滴加蓝墨水，观察

蓝色深浅是否一致。用过的双碟经高压灭菌倒出培养基后，置玻璃仪

器专用洗液或其它清洗液中浸泡过夜，冲洗，沥干，置150～160℃

干热灭菌２小时或高压121℃蒸气灭菌30分钟，备用。

4.2.3.陶瓦盖：内径约103mm，外径108mm，平坦，吸水性强，应

定期干燥、清洗。

4.2.4.钢管：内径（6.0±0.1）mm，高(10.0±0.1),外径(8.0±0.1)或（7.8

±0.1）ｍｍ,每套钢管重量差异不超过±0.05ｇ，内外壁及两端面

光洁平坦，管壁厚薄一致。每次使用后应置１:100新洁尔灭溶液内，

浸泡２小时以上，进行灭菌后再行洗涤，先用水洗涤，超声波超声

30分钟或用沾有去污粉的纱布条串擦内外壁，

冲洗，淋干，再用蒸馏水冲洗３次后，置带盖的容器内，150~160℃

干热灭菌２小时备用。

4.2.5.钢管放置器：置于半无菌操作间内，有６孔和４孔两种，钢管

下落时应垂直平稳、位置正确，双碟升降平稳。应保持清洁，防止

抗生素污染。可定期用75％乙醇棉擦拭，并用乙醇棉火焰烧小孔。

置钢管的玻璃管定期干烤灭菌。

题目抗生素微生物检定法操作规程共15页

文件编码JH—CZ—ZL—113—R02第3页

恒温培养箱隔水式为宜，35~37℃及24~26℃，隔板上可备有带孔

的玻璃板并垫平。

4.2.6.灭菌刻度吸管：吸取菌液及培养基用。试验用后应立即置５％

石炭酸或１：100新洁尔灭溶液中消毒后再按玻璃容器常规洗涤。吸

口处塞入脱脂棉（应松动，透气），置适宜容器中,120℃以上干热灭

菌２小时或121℃蒸气灭菌30分钟,烘干备用。

4