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神经元标记物

PatimaTanapatPh.D.

patimadottanapatatgmaildotcom

Princeton,NewJersey,UnitedStates

译者

王秀英博士

maryatlabomedotcom

美国新泽西州普林斯顿合原研究有限责任公司(SynatomResearch)

DOI

日期

更新:2013-10-19;原始版:2013-06-05

引用

实验材料和方法2013;3:196

简介

神经元是大脑的基本信号组件。因此，一切尝试从整体上了解大脑是如何工作的基本组成部分都要从研究功能不同的各类型神经细胞开始。为此，免疫组化标记已逐渐成为神经科学家最有价值的工具之一。利用各种细胞组分的抗体，研究者能够识别表达神经细胞表型的细胞，而且，就其形态特征和特定蛋白表达收集信息。

在下面的章节中，将讨论可以区分不同神经元细胞类型的方法。此外，由于能够将神经元和其他类型脑细胞区分开来非常重要，也会简要描述这些其他类型细胞。最后，免疫组织化学作为一种工具用于检验神经元群也会有讨论，重点介绍最常用的标记，以及在选择一个标记为一个特定的研究对象时一些关键的考虑因素。

大脑的细胞

神经元

神经元由四个不同形态的部分构成：细胞体（躯干）、树突、轴突和突触前末梢。这些高度特化的细胞结构使它们能够传播电信号或动作电位，是神经元之间通信的基础。细胞体是细胞代谢的中心。它包含含有细胞DNA的细胞核和其他细胞器。从细胞体延伸出两种突起。第一种类型，称为树突，接收传入的信号，而第二种类型，轴突，输出传出的信号。通常情况下，神经元有多个树突。每个树突反过来又都可以包含成千上万的棘状突起，是从其他神经元的轴突输入信号的节点。（应该指出的是轴突也可能突触于胞体或轴突上，尽管这种现象并不常见。）轴突从细胞体上叫做轴突丘的区域延伸出来，负责动作电位的传播。它最终会分为几个分支，终止于突触。尽管突触被说成是神经元之间的接触点，但细胞之间并不互相接触，而是由称为突触间隙的结构分隔开来。在每个轴突分支的末端是突触前末端，其中包含充满神经递质的囊泡。当一个动作电位到达终端，囊泡的内容物被释放到突触间隙从而与突触后细胞的进行化学通讯。

神经胶质细胞

除了神经元，大脑也包含另一类称为神经胶质细胞的细胞。神经胶质细胞为神经??元提供结构和代谢支持。它们大致可分为胶质细胞和小胶质细胞两大类。胶质细胞在生理条件下存在于发育和成年阶段。胶质细胞有四大类：星形胶质细胞、少突胶质细胞、室管膜细胞、放射状胶质细胞。星形胶质细胞支持和滋养脑细胞。它们保持了细胞外的离子平衡，为血管内皮细胞提供生化支持，并协助维持血-脑屏障。少突胶质细胞负责生成和长期维护，髓鞘能够隔离神经轴突和帮助动作电位的传播。室管膜细胞形成心室上皮层，包含脑脊液的空腔，以及脊髓中央管。它们也形成围绕脉络丛的上皮细胞层，脉络丛也产生脑脊液，作为血液和中枢神经系统之间的界面。放射状胶质细胞，其特点是有长的棘状突起，能协助新的神经细胞的迁移，在中枢神经系统的类型和区域特异性分化中发挥作用，并已被确定为生成神经元和神经胶质细胞的前体[1][2]。

小胶质细胞最初来源于骨髓髓系祖细胞，在介导基于细胞的中枢神经系统的免疫功能中发挥了关键作用，包括细胞表面抗原呈现，通过分泌各种细胞因子促进炎症反应[3]。他们能通过吞噬清除杂质，以及分泌细胞因子改变疾病进展[4]。在发育过程中，小胶质细胞被认为在突触重塑、细胞凋亡、吞噬细胞清除和血管生成中发挥作用[5]。在成年后，小胶质细胞被发现参与调控细胞凋亡、突触消除、神经再生??、神经监测以及病理条件下重塑中枢神经系统的管脉系统[5][6]。这些观察表明，小胶质细胞对于神经通路的成熟和塑造，以及这些通路调控下的神经活动是至关重要的。按照这个想法，也有人提出小胶质细胞的功能障碍可能是诱导精神和神经系统紊乱的一个原因[4]。

大脑微管脉组织

构成大脑微血管的内皮细胞也与我们讨论的非神经元细胞相关。伴随星形胶质细胞，这些细胞参与形成血-脑屏障（BBB）。血-脑屏障紧密调节离子、分子和细胞在血液和中枢神经系统之间运输，为适当的神经功能以及防止损伤和疾病提供所需的环境。血脑屏障的一个主要作用是防止血液中的有毒物质进入大脑。

鉴定神经细胞的类型

认识到神经家族存在巨大差异的第一个人，是神经生物学的奠基人SantiagoRamonyCajal。利用高尔基银染法，他观察到了单个神经元高度特异的形态特征。在这样做时，他发现，组成大脑的各种细胞在大小和形状上都有很大差异。而一些神经元如颗粒细胞从一个小胞体的产生呈现出相对简单的过程，