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组织培养过程中所用到的用具
在植物组织培养过程中,使用的用具类型多样,如培养基配置用具、培养用具、接种用具等。在使用这些用具时,必须了解它的基本
用途并学会它们的基本用法。
1、培养基配置用具
(1)烧杯用于盛放、溶解化学药剂等,常用的规格有50ml、100ml、200ml、250ml、500ml、1000ml等。
(2)容量瓶用于配制标准溶液,常用的规格有50ml、100ml、500ml、1000ml等。
(3)量筒用于量取一定体积的液体,常用的规格有25ml、50ml、100ml、500ml、1000ml等。
(4)刻度移液管用于量取一定体积的液体,常用的规格有1ml、5ml、10ml、20ml等。
(5)吸管用于吸取液体,调节培养基的pH值及溶液定容时使用。
(6)玻璃棒用于溶解化学药剂时搅拌时用。
2、培养用具
(1)试管植物组织培养中常用的一种玻璃器皿,适合少量培养基及实验不同配方用。选用1.0cm*15cm和3.0cm*20cm规格的试管。
(2)三角瓶植物组织培养中常用的培养容器,适合各种培养,如固体培养或液体培养,大规模或一般的少量培养。规格有50ml、
100ml、150ml、200ml、500ml等,其口径均为25mm。三角瓶的好处是采光好,瓶口较小不易失水。
3、接种用具
(1)酒精灯用于金属接种工具的灭菌。
(2)手持喷雾器盛装70%的酒精,用于接种器材、外植体和操作人员手部等的表面灭菌。
(3)镊子使用于转移外植体和培养物,接种操作及继代培养时移取织物材料用。
(4)剪刀用于剪取外植体材料及接种时用。
3、小型器具
移液枪用于配制培养基时添加各种母液及吸取定量植物生长调节物质溶液。有固定式和可变式两种,规格有25、100、500、1ml、5ml、
10ml。
微波炉、电炉等加热器具用于加热生化试剂时,溶解琼脂。
4、仪器
(1)酸度计植物组织培养基的pH值的调整十分重要。因此,配制培养基时,需要用酸度计来测定和调整pH值。常用小型式酸度计,即
可在配制培养基时使用,又可测定培养过程中pH值的变化。测定培养基pH值时,应注意搅拌均匀后再测定。酸度计在使用之前,要调节
温度到适当的室温,在用pH标准液(pH值4.0或pH值7.0)矫正后,蒸馏水充分洗净,才能进行pH的测定与调整。
(2)天平称量化学试剂用,用到的有以下两种:
药物天平用于称量大量元素、琼脂、蔗糖等,称量精度为0.1g。
电子天平精度0.001,用于称量微量元素植物激素及微量附加物。
(3)高压蒸汽灭菌锅用于培养基、蒸馏水、和各种器具的灭菌消毒等是植物组织培养中最基本的设备之一。高压蒸汽灭菌时,一般在
121摄氏度控温15-40min,即可切断电源,缓慢将压制读数为0时,方可取出灭菌物。
(4)冰箱用于储存培养基母液。生化试剂及低温处理材料,一般用家用冰箱即可。
培养基
1.2.1培养基成分
培养基的成分是通过分析指物体的成分而制定的。一般培养几种常见的陈分有如下几种:
1.2.1.1水
培养基中大部分成分是水,可提供植物所需要的碳、氢、氧,配制培养基时一般用离子交换水、重蒸馏水、蒸馏水。
1.2.1.2无极营养成分
(1)无机大量元素指培养几种含量超过100mg/L的无机元素,包括N、P、K、Ca、Mg、S等。
1氮(N)。是细胞中核算的组成成分,也是生物体中许多酶的组成成分,氮被植物吸收后转化为氨基酸再转化为蛋白质,然后被
植物利用,氮还是叶绿体、维生素和植物激素的组成成分。氮主要以铵态氮、硝态氮两种形式被使用,实际中常常将两种混合使
用,以调节培养几种的离子平衡,利于细胞的生长发育。一般认为,铵态氮的含量超过8mmol/L时容易伤害培养基。
2磷(P)。参与植物生命活动中核酸和蛋白质的合成、光合作用、呼吸作用以及能量的储存、转化与释放等重要的生理生化过
程,增强植物的抗逆能力,促进早熟。组织培养过程中培养物需要大量的磷。常以盐的形式供给。
3钾(K)。是许多酶的活化剂。组织培养过程中钾能促进器官和不定胚的分化,促进叶绿体ATP的合成,增强植物的光合作用和
产物的运输,能调节植物细胞水势,调控气孔运动,提高植物的抗逆性能。钾常以盐的形式供给。
4钙、镁、硫(Ca、Mg、S)。也是植物的必需元素,参与细胞壁的构成,影响光合作用,促进代谢等生理活动。钙、镁和硫的浓
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