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鱼肉中孔雀石绿残留物的快速检测表面增强拉曼光谱法
1范围
本文件规定了采用表面增强拉曼光谱法快速测定鱼肉中孔雀石绿残留量的方法。
本文件适用于鱼肉中孔雀石绿的表面增强拉曼光谱快速筛查检测。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T6682分析实验室用水规格和实验方法
GB/T20361-2006水产品中孔雀石绿和结晶紫残留量的测定高效液相色谱荧光检测法
3术语和定义
3.1
表面增强剂surfaceenhancer
能够显著增强吸附在其表面的分子的拉曼散射信号的纳米结构材料。
3.2
空白样品blanksamples
不含目标分析物，且组成及物理化学性质与检测样品相同或充分相似的样品。
[来源：GB/T32467-2015，有修改]
4方法原理
试样中的孔雀石绿残留用乙腈提取，经中性氧化铝柱净化后，用表面增强拉曼检测仪测定。孔雀石
绿分子与表面增强剂混合后，目标分子吸附在表面增强纳米粒子上从而增强其拉曼散射信号。表面增强
拉曼检测仪可通过自动识别特征峰对孔雀石绿进行定性检测。
5试剂与材料
本方法所用水为GB/T6682规定的三级水。
5.1试剂
5.1.1乙腈（CHCN）：分析纯。
3
5.1.2醋酸铵（CHCOONH）：分析纯。
34
5.1.3无机盐混凝剂：1mol/L氯化钠水溶液，或其他相当的无机盐溶液。
5.1.4醋酸铵溶液（5mmol/L）：称取0.385g醋酸铵，用水溶解，定容至1000mL，现用现配。
5.2标准品
5.2.1孔雀石绿标准品（CAS569-64-2）：纯度≥99.0%。
1
5.3标准溶液配制
5.3.1孔雀石绿标准储备溶液（）
50μg/mL
称取5.0mg（精确至0.01mg）孔雀石绿标准品于100mL容量瓶中，用乙腈溶解并稀释至刻度，
-18℃避光保存，有效期3个月。
5.3.2孔雀石绿标准中间溶液（0.5μg/mL）
吸取1.00mL孔雀石绿标准储备溶液于100mL容量瓶中，用乙腈稀释至刻度，-18℃避光保存，
有效期1个月。
5.3.3孔雀石绿标准工作溶液（5μg/L）
吸取1.00mL孔雀石绿标准中间溶液于100mL容量瓶中，用乙腈稀释至刻度，现用现配。
5.4材料
[1]
5.4.1表面增强剂：纳米金-三聚氰胺海绵，纳米金，纳米银，或其他适用。
5.4.2中性氧化铝柱：80~120目，使用前用5mL乙腈活化。
5.4.3有机0.2μm滤膜。
6仪器和设备
6.1表面增强拉曼光谱仪。
6.2分析天平：感量、。
0.01mg0.01g
6.3离心机：转速⩾4000r/min。
6.4涡旋仪。
6.5匀浆机。
6.6超声波清洗仪。
6.7旋转蒸发仪。
6.8KD浓缩瓶：25mL。
7试样的制备与保存
7.1试样的制备
取适量新鲜或解冻的空白或供试组织的可食部分，绞碎，并使均质。
a)取均质后的供试样品，作为供试试样；
b)取均质后的空白样品，作为空白试样；
7.2试样的保存
-18℃以下保存。
2
8步骤
8.1提取
称取约±的试样于离心管中。加入乙腈，超声振荡提取，涡
5.0g(0.01g)50mL11mL2min
旋，
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