非洲猪瘟病毒细胞传代致弱株研究进展.pptxVIP

非洲猪瘟病毒细胞传代致弱株研究进展汇报人：2024-01-21

目录引言非洲猪瘟病毒细胞传代致弱株的制备方法非洲猪瘟病毒细胞传代致弱株的生物学特性

目录非洲猪瘟病毒细胞传代致弱株的遗传稳定性研究非洲猪瘟病毒细胞传代致弱株的应用前景与挑战结论与展望

引言01

ASFV具有多种传播途径，包括直接接触感染猪只、间接接触污染的环境或物品以及通过软蜱等节肢动物传播。病毒的基因组庞大且复杂，编码多种与宿主互作、免疫逃避和毒力相关的蛋白。非洲猪瘟病毒（ASFV）是一种大型、复杂且致命的DNA病毒，属于非洲猪瘟病毒科。该病毒主要感染家猪和野猪，引起急性、热性、高度接触性传染病，致死率极高。非洲猪瘟病毒概述

细胞传代致弱株（Cell-adaptedattenuatedASFV）是通过在细胞培养物中连续传代ASFV而获得的毒力减弱的病毒株。这类病毒株在保留免疫原性的同时，降低了对宿主的致病力，因此具有重要的疫苗开发潜力。通过研究细胞传代致弱株的生物学特性、基因组变异以及与宿主互作的机制，可以为ASFV的防控提供新的思路和方法，同时也有助于深入了解ASFV的致病机制和免疫逃逸策略。细胞传代致弱株的意义

揭示ASFV细胞传代致弱株的基因组变异和生物学特性，为疫苗设计和优化提供理论依据。探究ASFV细胞传代致弱株与宿主互作的分子机制，为抗病毒药物和治疗方法的研究提供新的思路。通过比较ASFV野毒株与细胞传代致弱株的差异，深入了解ASFV的致病机制和免疫逃逸策略，为ASFV的防控提供科学依据。推动ASFV疫苗的研发和应用，提高全球养猪业的生物安全水平，保障人类食品安全和公共卫生安全。研究目的和意义

非洲猪瘟病毒细胞传代致弱株的制备方法02

选择适宜的细胞系01非洲猪瘟病毒常用的细胞系有猪肺泡巨噬细胞、猪肾细胞等，这些细胞系对病毒敏感且易于培养传代。细胞培养条件02维持适宜的温度（37℃）、湿度和CO2浓度（5%），使用含适量血清和生长因子的培养基。细胞传代方法03待细胞生长至80%-90%汇合度时，进行传代。传代前需用胰蛋白酶或EDTA等消化液处理细胞，使其从培养瓶壁上脱落，然后按照一定比例接种到新的培养瓶中。细胞培养与传代

病毒扩增接种后，将细胞培养物置于适宜条件下（如37℃、5%CO2）进行培养，病毒在细胞内复制扩增。定期观察细胞病变情况，待大部分细胞出现病变时，收集病毒液。病毒接种将非洲猪瘟病毒接种到已长满的细胞培养物中，通常使用无血清培养基稀释病毒液，接种量视实验需求而定。病毒接种与扩增

通过连续多轮细胞传代培养，筛选出病毒毒力逐渐降低的致弱株。每轮传代后，对病毒液进行毒力测定，选择毒力降低的病毒株进行下一轮传代。对筛选出的致弱株进行基因序列分析、生长曲线测定、毒力比较等实验，以确认其致弱特性。同时，还需进行动物实验验证致弱株在体内的安全性和免疫原性。致弱株筛选致弱株鉴定致弱株的筛选与鉴定

非洲猪瘟病毒细胞传代致弱株的生物学特性03

01病毒粒子呈圆形或椭圆形，直径约为175-215纳米，具有囊膜结构。02病毒粒子的核心由核酸和蛋白质组成，呈螺旋对称。在细胞培养物中，病毒粒子以出芽方式从感染细胞中释放。形态学特性02

生长特性非洲猪瘟病毒细胞传代致弱株在细胞培养物中生长迅速，通常在接种后24-48小时内即可观察到明显的细胞病变。该病毒株对多种细胞系具有感染性，但不同细胞系对其敏感性存在差异。在适宜的条件下，该病毒株能够在细胞培养物中实现高效复制，产生大量的子代病毒。

免疫学特性非洲猪瘟病毒细胞传代致弱株能够刺激机体产生特异性免疫反应，包括体液免疫和细胞免疫。在感染过程中，病毒粒子表面的囊膜蛋白是主要的免疫原，能够诱导机体产生中和抗体和细胞毒性T淋巴细胞反应。该病毒株的免疫学特性与其毒力密切相关，致弱株通常具有较低的免疫原性，但仍能够诱导机体产生一定程度的免疫保护。

非洲猪瘟病毒细胞传代致弱株的遗传稳定性研究04

全基因组测序通过对非洲猪瘟病毒细胞传代致弱株的全基因组进行测序，了解其基因组结构和基因组成。基因组比对将测序结果与原始毒株及不同代次的细胞传代致弱株进行比对，分析基因组的变异情况和变异规律。关键基因分析针对非洲猪瘟病毒的关键基因，如囊膜蛋白基因、核衣壳蛋白基因等，进行深入分析，探讨这些基因的变异对病毒生物学特性的影响。基因组序列分析

遗传变异规律研究通过对不同代次的细胞传代致弱株进行遗传变异分析，了解病毒在传代过程中的基因组变异情况，揭示病毒的遗传变异规律。遗传变异的累积效应分析病毒在连续传代过程中遗传变异的累积效应，探讨这些变异对病毒毒力、抗原性、宿主范围等生物学特性的影响。遗传变异的分子机制深入研究病毒遗传变异的分子机制，包括基因突变、基因重组、基因重配等，为理解病毒的进化提供理论支持。传代过程中的遗传变异

遗传稳定性评