(1.4)--云南昭通乌天麻中天麻素和对羟基苯甲醇的测定.pdf

云南昭通乌天麻中天麻素和对羟基苯甲醇的测定

一、实验目的

1、掌握天然药物中有效成分的提取方法和原理；

2、掌握单点外标法对指定成分进行定量分析；

3、掌握高效液相色谱仪的基本原理及使用方法。

二、实验原理

天麻为兰科植物天麻（GastrodiaelataBlume）的干燥块茎，主产于贵州、

陕西、四川、云南、湖北等地，是一味著名的常用中药材，具有平肝息风止痉的

[1]

功能。现代药理表明：天麻具有镇痛、抗炎、抗衰老、改善学习记忆力、抗惊

[2-3]

厥作用，临床用于头痛目晕、中风、风湿痹痛等症。天麻素和对羟基苯甲醇

为天麻的主要有效成分。测定天麻素和对羟基苯甲醇含量对天麻药材及相关中成

药的质量控制有着重要意义。在《中国药典》2020年版中规定天麻药材中天麻

[4]

素和对羟基苯甲醇总含量不得少于0.25%。天麻素和对羟基苯甲醇结构如下：

天麻素对羟基苯甲醇

云南昭通是世界天麻原产地，是全国品质最优的野生天麻核心区域，是全国

公认的天麻道地药材产区，被誉为“中国乌天麻之乡”。全市完成规范化种植8.02

万亩，实现鲜麻总产量3609万公斤，综合产值51.43亿元，位居全国六大天麻

产区之首，天麻产业从业人员超过10万余人。本实验用超声提取法提取云南昭

通乌天麻药材中天麻素和对羟基苯甲醇，用高效液相色谱对天麻素和对羟基苯甲

醇进行测定。对昭通乌天麻样品中天麻素、对羟基苯甲醇含量情况进行分析评估，

为云南道地药材天麻的种植、生产加工等提供参考，为昭通乌天麻质量控制提供

合理依据。

高效液相色谱法（HighPerformanceLiquidChromatography）是指用液

体作为流动相，根据组分在固定相上吸附或分配不同使之分离的一种高效能色谱

方法或高效液相色谱法。其过程是用高压输液泵将具不同极性的单一溶剂或不同

比例的混合溶剂，缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，经进样阀注入供试

品，由流动相带入柱内，在柱内各组分被分离后，依次进入检测器，色谱信号由

记录仪或积分仪记录。

1、定性分析

在相同的色谱条件下（流动相组成及比例、色谱柱、柱温等不变），任何物

质都有一确定的保留值，即保留时间和保留体积。因此在了解样品来源、性质的

情况下，如果在相同的色谱条件下被测化合物与标样的保留值相一致，就可以初

步认为被测化合物与标样相同。

本实验采用外标法进行定性分析。测定已知标准物质的保留时间，当待测

组分的保留时间在已知标准物质的保留时间预定的范围类，即被测定。

2、定量分析

本实验采用外标法进行定量分析。外标法是以被测化合物的纯品作为标准

品，取一定量已知浓度的标准品溶液注入色谱柱得到其响应值（峰面积），在一

定浓度范围内，标样量与响应值之间有比较好线性关系，可用下式表示：

A=KcV

0000

其中：A是峰面积；c为标样溶液浓度；V为注入的标样溶液体积。

000

由已知的A、c、V既可以求出系数K。然后，在完全相同的色谱条件下，

000

注入欲测样品体积为V，得面积A，根据上式，由已知的A、V及K值，即

1111

能求出c，即欲测组分的浓度。

1

三、实验用品

（1）仪器

Agilent1200高效液相色谱仪，AgilentEclipseXDB-C18(4.6mm×150mm，

5μm)色谱柱；三号筛；万分之一电子分析天平；0.45μm滤膜；超声波提取仪，

EYELAN-1100型旋转蒸发仪，具塞锥形瓶，容量瓶等

（2）试剂及原料

天麻素对照