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【液相色谱及液质联用版面联合讲座】－－－液质联用之液相部分详解

序言

第一阶段

液相部分

液相仪器发展历史

液相仪器基本构造及原理

液相仪器应用领域

液相仪器各厂家的仪器展

液质部分

液质仪器发展历史

液质仪器基本构造及原理

液质仪器应用领域

液质仪器各厂家的仪器展

第二阶段

板油问题及观点见解

第三阶段

版主专家帖子整理及活动总结

——-——本活动由液相色谱、液质联用联合主办

液相部分

一、液相仪器发展历史

从1903年Tswett发表了吸附色谱分离植物色素的论文(Tswett在波兰华沙大学研

究植物叶子成分时，把碳酸钙粉末装在一个细长的玻璃管中，把从叶子中用石油醚

萃取的物质倒在管中的碳酸钙粉末上面，然后用石油醚洗脱被吸附的色素，在管中

形成了不同的颜色色带，Tswett当时叫这种色带为色谱，并发表论文到德国植物学

杂志上）至今，色谱技术已有近百年的发展历史。特别是60年代现代液相色谱技术

的问世，使其在生命科学、药物化学、食品卫生、环境化学等诸多领域得到了广泛

的应用。

在所有色谱技术中,液相色谱法（liquidchromatography，LC）是最早(1903年）发

明的,但其初期发展比较慢，在液相色谱普及之前，纸色谱法、气相色谱法和薄层色

谱法是色谱分析法的主流。到了20世纪60年代后期，将已经发展得比较成熟的气

相色谱的理论与技术应用到液相色谱上来，使液相色谱得到了迅速的发展。特别是

填料制备技术、检测技术和高压输液泵性能的不断改进，使液相色谱分析实现了高

效化和高速化。具有这些优良性能的液相色谱仪于1969年商品化。从此，这种分

离效率高、分析速度快的液相色谱就被称为高效液相色谱法（highperformanceli

quidchromatography，HPLC)，也称高压液相色谱法或高速液相色谱法。经过30

多年的发展，现代高效液相色谱技术得到了不断的完善和改进，在输液泵、检测器、

色谱柱及数据控制和处理系统等方面采用了许多专利技术，使泵的稳定性和重复性、

检测器的灵敏度和检出能力、色谱柱的分离效能和应用范围及数据处理软件的智能

化得到了很大的提高。

气相色谱只适合分析较易挥发、且化学性质稳定的有机化合物，而HPLC则适

合于分析那些用气相色谱难以分析的物质，如挥发性差、极性强、具有生物活性、

热稳定性差的物质.现在，HPLC的应用范围已经远远超过气相色谱，位居色谱法之

首。

从原理来看，高效液相色谱同经典液相色谱比较，没有很大的区别,主要体现在高灵

敏度检测，高压泵和高效固定相填料。在保持高效分离效率,高检测灵敏度和高分析

速度前提下,也保持了经典液相色谱的特点：分析样品种类多，流动相多样化和便于

制备色谱等特点。高效液相色谱与经典液相色谱比较如下图:

所以液相色谱特点主要是：高分离度(由于使用高效固定相，分析样品柱效可达到十

-9

几万）；高灵敏度（使用紫外检测器可以检测出10g，使用荧光检测器可以达到1

0—12g）；高分析速度（一般含量测定的只要几分钟到几十分钟）,还有适用范围广，

易制备等特点.

二、液相仪器基本构造及原理

1、高效液相仪的构成

高效液相色谱仪主要包括以下部件：溶剂瓶,溶剂瓶箱,在线脱气机，液相泵,（手动）

自动进样器（六通阀)，色谱柱，柱温箱，检测器。不同的配置可以有不同的模块（如

自动进样器恒温器，二维色谱接不同类型检测器等）.仪器如图

液相色谱管路流程为：

依次流程为：（溶剂瓶)流动相→脱气机→液相泵(混合器，阻尼器）→进样器→色

谱柱→检测器→废液

2、在线脱气机

脱气机是对溶剂瓶中的流动相进行脱气的，主要包括部件真空泵,传感器，电磁阀，

控制器，真空腔等。

主要部件包括以下几个（实物图）

CN、SW开关(调节到连续模式）

传感器

电磁阀

控制器

真空泵

真空腔

脱气机全图

3、液相泵

液相色谱的输液系统主要是用高压输液泵（制备色谱对压力的要求相对较低),对泵的

2

各项技术指标要求较高。一般最高输出压力应在401～600kg/cm，流量范围0.1-l

0ml/min。为使对液体流速敏感的检测器能稳定地工作，使色谱定性、定量分析具有

良好的重现性,