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蛋白质分离常用的方法
蛋白质分离主要根据五种原理:分子大小、溶解度、电荷、吸附性质、对配体分子的生物学亲和力等。
一、根据分子大小不同的纯化方法
透析和超过滤
透析(dialysis)是利用蛋白质分子不能通过半透膜的性质,使蛋白质和其它小分子物质分开。常用的半透膜是玻璃纸或称赛璐玢纸(cellophanepaper)、火棉纸(celloidinpaper)和其它改型纤维素材料。
密度梯度离心
凝胶过滤
二、利用溶解度差别的纯化方法
等电点沉淀和pH控制
蛋白质的盐溶和盐析
有机溶剂分级分离法
温度对蛋白质溶解度的影响三、根据电荷不同的纯化方法1.电泳
聚丙烯酰胺凝胶电泳
毛细管电泳
等电聚焦
层析聚焦
离子交换层析
四、利用选择性吸附的纯化方法
羟磷灰石层析
疏水作用层析
五、利用对配体的特异性生物学亲和力的分离纯化
五、利用对配体的特异性生物学亲和力的分离纯化
六、高效液相层析和快速蛋白质液相层析
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