改进的表达元件.pdfVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局

(12)发明专利说明书

(10)申请公布号CN1748034A

(43)申请公布日2006.03.15

(21)申请号CN200480003321.1

(22)申请日2004.02.02

(71)申请人创新公开有限公司

地址英国伦敦

(72)发明人史蒂文·杰兰特·威廉姆斯罗伯特·拉克兰·克龙比凯·史蒂文·利平斯基阿利斯

泰尔·辛普森·欧文

(74)专利代理机构中原信达知识产权代理有限责任公司

代理人杨青

(51)Int.CI

C12N15/85

C12N5/10

C12Q1/68

A61K48/00

权利要求说明书说明书幅图

(54)发明名称

改进的表达元件

(57)摘要

本发明涉及改进的提供可操作连接

的基因在各种组织中高水平表达的遗传元

件。尤其是，未甲基化的的片段，小于

2kb的CpG岛显示提供增强的转基因表达

和在载体构建和克隆容量上具有优势。

法律状态

法律状态公告日法律状态信息法律状态

权利要求说明书

1.分离的多核苷酸，包括

a)延伸的无甲基化CpG岛；

b)可表达的开放阅读框，可操作连接到所述延伸的无甲基化CpG岛；

c)启动子，可操作连接到所述开放阅读框，其中所述启动子不天然地连接到所述

CpG岛；

其特征在于所述的CpG岛不超过2kb大小并且其中所述开放阅读框的可重复表达

在两种或更多的组织类型中获得。

2.权利要求1的多核苷酸，其中所述CpG岛包括HP-1/hnRNPA2位点的片段。

3.权利要求2的多核苷酸，其中所述片段是人HP-1/hnRNPA2基因座。

4.权利要求1到3任一项的多核苷酸，包括不超过1.6kb的HP-1/hnRNPA2基因座

的片段。

5.权利要求4的多核苷酸，包括Esp31限制性片段。

6.权利要求5的多核苷酸，包括图2的序列，核苷酸977到2522(SEQIDNO：1)或

其功能类似物。

7.权利要求1到6任一项的多核苷酸，包括不超过1kb的HP-1/hnRNPA2基因座的

片段。

8.权利要求7的多核苷酸，包括BspE1-Esp31限制性片段。

9.权利要求8的多核苷酸，包括图2的序列，核苷酸1536到2522(SEQIDNO：2)

或其功能类似物。

10.载体，含权利要求1到9任一项的多核苷酸。

11.权利要求10的载体，其中的载体是游离型载体。

12.权利要求10的载体，其中的载体是整合型载体。

13.权利要求10-12任一项的载体，其中的载体是质粒。

14.权利要求10到13任一项的载体，其中可操作连接的基因是治疗性核酸。

15.权利要求10到14任一项的载体，包括下述的任意项：SEQIDNOs1或2，

CMV启动子、多克隆位点、多腺苷酸序列和在合适的控制元件下编码选择性标记

物的基因。

16.宿主细胞，包括权利要求1到9任一项的多核苷酸，或权利要求10到15任一

项的载体。

17.权利要求1到9任一项的分离的多核苷酸、权利要求10到15任一项的载体或

权利要求16的宿主细胞，用于基因治疗。

18.权利要求1到9任一项的多核苷酸、权利要求10到15任一项的载体或权利要

求16的宿主细胞在制备用于基因治疗的药物中的应用。

17.治疗方法，包括给需要这种治疗的患者施用权利要求1到9任一项的有效剂量

的多核苷酸、权利要求10到15任一项的载体或权利要求16的宿主细胞。

18.药物组合物，与药用赋形剂组合的权利要求1到9任一项的多核苷酸、权利要

求10到15任一项的载体或权利要求16的宿主细胞。

19.权利要求1到9任一