HPLC性能测试_原创精品文档.pdfVIP

....

HPLC性能测试

一、仪器性能测试

1、流量准确性与重复性

泵的稳定性与流量准确与否直接相关。以100%水为流动相（经过过滤和脱气

处理），设定流量为1ml/min，在泵出口处连接电子流量计，待流速稳定后连续

记录5次读数，以5次读数的平均值作为流量测定值F,重复上面的测定步骤3

m

次，按照下式计算S和S

SR

SFFF

=（-)/×100%

SmSS

式中：S——流量准确度（%）

S

F——流量实测值，ml/min（取三次测量的平均值）

m

F——流量设定值，ml/min

S

S=×

R

S——流量重复性误差（%）

R

F——流量实测值，ml/min

m

——同一组测量的算术平均值，ml/min

按照同样步骤测试0.1ml/min、2ml/min与5ml/min的相应指标。

2、噪声与漂移

实验条件：紫外吸收波长为254nm，流动相为100%甲醇，流速为1.0ml/min，

选用C色谱柱，开机，平稳运行2h后，记录基线60min,利用工作站计算噪声

18

和漂移。

3、检出上限

将检测器和记录仪连接好，检测器波长选在254nm,通电稳定后，用注射器直

接向检测池中注射2%异丙醇水溶液冲洗检测池至记录仪读数不变，记下此值。

之后，依照上法分别注入丙酮/2%异丙醇系列水溶液（丙酮含量为0.1%、0.2%、

0.3%…1.0%）冲洗检测池，并记录各溶液对应的稳定记录仪读数，每个溶液重复

......

....

测量3次，取算术平均值。以5个丙酮含量（0.1%-0.5%）和对应的记录仪读数

做标准曲线，在曲线上找出丙酮含量大于0.5%各点的读数，与对应含量的测量

值做比较，测量值低于读数5%时，认为曲线弯曲，此点的浓度作为检测上限C。

H

二、应用性能测试

1、梯度误差

由梯度控制装置设置阶梯式的梯度洗脱程序，A溶剂为纯水，B溶剂为含0.1%

丙酮的水溶液，B经由5个梯度从0变到100%(0%-20%-40%-60%-80%-100%)。将

输液泵盒检测器连接（不接色谱柱），开机后以A溶剂冲洗系统，基线平稳后开

始执行梯度程序，求出A,B溶剂不同比例时的输出信号值（或记录仪读数），重

复测量2次，计算平均值。从B溶剂的含量及对应的输出信号值（或记录仪读数），

按下式计算梯度误差Gci,取Gci最大者作为仪器梯度误差。

Gci=()/×100%

式中：Gci——第i段梯度误差

——第i段输出信号值（或记录仪读数）平均值

——各段输出信号（或记录仪读数）平均值的平均值

2、流速影响

在不同流速下（1ml/min、2ml/min、4ml/min）分别按照一定的色谱条件测定

校准品，比较反相色谱和正相色谱、多元组分体系和单组分体系在不同流速下的

测定结果及对峰面积的影响。

3、波长准确度与重复性

在不同波长下分别按照一定的色谱条件测定各种标准样品的色谱图，比较设

定的波长与标准样品实测波长得出波长的准确度，重复测量3次，以3