3.1.2 重组DNA技术的基本工具课件-高二下学期生物人教版选择性必修3.pptx

课前背诵：1.重组DNA分子过程中，分子工具有哪些？2.限制酶的来源、切割部位、识别序列特点、切割结果是？

第3章基因工程第1节重组DNA技术的基本工具(第二课时)

学习目标1.理解并掌握DNA连接酶的种类和作用2.掌握基因工程载体需要具备的条件

自学指导1：阅读72页“分子缝合针”，回答下列问题，限时3分钟1、DNA连接酶定义是？2、DNA连接酶的作用和分类分别是？3、DNA连接酶与DNA聚合酶（复习DNA复制过程）是一回事吗？为什么？4、阅读课时练78页表格，分析与DNA相关的5种酶的区别种类来源特点相同点现在给大家1分钟时间组内交流答案，解决疑惑

502“分子缝合针”----DNA连接酶2.作用：将双链DNA片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的。①②1.定义：将两个DNA片段连接起来的酶，称之为DNA连接酶。磷酸二酯键

二、“分子缝合针”——DNA连接酶种类E·coliDNA连接酶T4DNA连接酶来源________________________特点只缝合____________缝合____________和____________相同点恢复被限制酶切开的两个脱氧核苷酸之间的_________________大肠杆菌T4噬菌体黏性末端黏性末端平末端(效率较低)磷酸二酯键3.DNA连接酶的种类及作用

702“分子缝合针”----DNA连接酶两DNA片段要具有互补的黏性末端才能拼起来可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来，4.DNA连接酶的缝合作用

旁栏思考（p72）：DNA连接酶与DNA聚合酶是一回事吗？为什么？

能量解旋两条螺旋的双链脱氧核苷酸DNA聚合酶（形成磷酸二酯键）双螺旋结构DNA复制过程

旁栏思考（p72）：DNA连接酶与DNA聚合酶是一回事吗？为什么？DNA连接酶DNA聚合酶催化两个脱氧核苷酸之间形成磷酸二酯键不需要模板需要DNA的一条链为模板游离的DNA片段单个的脱氧核苷酸形成完整的DNA分子形成DNA的一条链基因工程DNA复制相同点不同点模板作用对象作用结果用途

1102“分子缝合针”----DNA连接酶4.几种相关酶的比较（课时练78页）名称作用部位作用结果限制酶DNA连接酶DNA聚合酶DNA(水解)酶解旋酶断开磷酸二酯键连接碱基对之间的氢键将DNA切成两个片段连接磷酸二酯键将两个DNA片段连接为一个DNA分子连接磷酸二酯键将单个脱氧核苷酸依次连接到单链末端断开磷酸二酯键将DNA片段水解为单个脱氧核苷酸将双链DNA分子局部解旋为单链

12【反馈练习】根据所学知识，完成以下填空：①限制酶②解旋酶③DNA连接酶④DNA聚合酶⑤RNA聚合酶baA.切断a处的酶为_______

B.连接a处的酶为_______C.切断b处的酶为_______①③④②a：磷酸二酯键；b：氢键

自学指导二：阅读P72-73“分子运输车”（思考讨论不看）,限时3分钟1、载体的作用是？种类有哪些？常用载体是？2、质粒的化学本质是？质粒分子上有几个限制酶切割位点，供外源DNA片段（基因）插入其中？携带外源DNA片段的质粒进入受体细胞后将如何进行复制？质粒分子上有哪些特殊的标记基因？3、根据以上问题总结，质粒作为载体需具备的条件？现在给大家1分钟时间组内交流答案，解决疑惑

三、基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”1.载体作用：2.种类：将送入受体细胞，在受体细胞内对目的基因进行大量复制。外源基因在基因工程中使用的载体包括等。质粒、噬菌体和动植物病毒种类用途不同点质粒、噬菌体植物病毒动物病毒将外源基因导入大肠杆菌等受体细胞将外源基因导入植物细胞将外源基因导入动物细胞它们来源不同，在大小、结构、复制方式以及可以插入外源DNA片段的大小也有很大差别动物病毒噬菌体

三、基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”3.常用载体：拟核DNA质粒大肠杆菌氨苄青霉素抗性基因目的基因插入位点复制起点大肠杆菌及质粒结构模式图(1)化学本质：是一种裸露、结构简单、独立于或________________外，具有能力的。真核细胞细胞核原核细胞拟核DNA自我复制环状双链DNA(2)基因工程中使用质粒的特点：在基因工程操作中，真正被用作载体的质粒，都是天然质粒的基础上进行过__________的。人工改造质粒

三、基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”4.质粒作为载体需具备的条件：拟核DNA质粒大肠杆菌氨苄青霉素抗性基因目的