抗 a 抗 b 血型定型试剂(单克隆抗体).pdf

抗A、抗B血型定型试剂（单克隆抗体）

KangA、KangBXuexingDingxingShiji(Dankelongkangti)

Anti-AandAnti-BBloodGroupingReagents(MonoclonalAntibody)

本品系用A血型单克隆抗体或B血型单克隆抗体配制而成，用于鉴定人ABO血型。

1基本要求

生产和检定用设施、原料及辅料、水、器具、动物等应符合凡例的要求。

2制造

2.1专用原材料

2.1.1杂交瘤细胞

杂交瘤细胞建株，需经几次克隆筛选，以100％克隆孔上清相应抗体阳性的作为原

始细胞株。原始细胞株经传代，稳定分泌特异性抗体的杂交瘤细胞株为主细胞。

杂交瘤细胞库的建立及检定应符合“生物制品生产和检定用动物细胞基质制备及检定

规程”规定。

工作细胞库经血凝效价测定合格后方能用于生产。

2.1.2染色剂

抗A可选用次甲基兰等蓝色染料、抗B可选用吖啶黄等黄色染料配制至适宜浓度。

2.1.3防腐剂

可选用叠氮钠、硫柳汞钠盐等，配制至适宜浓度。

2.1.4稳定剂

可选用蛋白质、葡萄糖、盐类等配制至适宜浓度，不得使用凝聚胺、聚乙二醇等促凝

剂用于配制稳定剂。

2.2制备程序

2.2.1杂交瘤细胞培养物上清液的制备

待杂交瘤细胞过度生长后收

抗A血型或抗B血型杂交瘤细胞经培养传代，取培养液

上清．检测血凝效价合格后扩大培养即得。

2.2.2小鼠杂交瘤腹水的制备

2.2.2.1小鼠腹腔预处理

健康BALB/c小鼠腹腔用石蜡油预处理。

2.2.2.2接种

检测抗A血型或抗B血型杂交瘤细胞培养物上清液抗体血凝效价合格后，用生理氯

化钠溶液或不完全培养液重新悬浮细胞，接种于数天前用石蜡油处理过的小鼠腹腔内。

2.2.2.3腹水的收集

接种后数周，处死小鼠收集腹水，离心去沉淀，以适当方法除纤维蛋白原，加入适宜

的防腐剂，－30℃及以下保存。

2.3半成品

2.3.1半成品配制

合并杂交瘤细胞培养物上清，可加入少量腹水混合，加入染色剂，使抗A血型定型

试剂呈蓝色，抗B血型定型试剂呈黄色，除菌过滤。

2.3.2半成品检定

按3.1项进行。

2.4成品

2.4.1分批

应符合“生物制品分批规程”规定。

2.4.2分装与冻干

应符合“生物制品分装与冻干规程”规定。

2.4.3规格

应为经批准的规格。

2.4.4包装

应符合“生物制品包装规程”规定。

3检定

3.1半成品检定

3.1.1效价测定

取抗A血型试剂、抗B血型试剂及国家参考品，2倍系列稀释至适宜稀释度，分别加

入相应的2％A、A、AB、B血型红细胞悬液，同时设红细胞悬液对照，置18～25℃反应

122

15分钟，以1000转/分钟离心1分钟后观察结果。抗A血型试剂对A、A、AB血型红细胞

122

的凝集效价应分别不小于1：128、1：32、1：16，抗B血型试剂对B血型红细胞的凝集效

价应不小于1：128，且不得低于国家参考品同步测定结果。

3.1.2特异性

于抗A血型试剂、抗B血型试剂中分别加入2％A、AB、B、O血型红细胞悬液，同时

12

设红细胞悬液对照，置18～25℃反应15分钟，以1000转/分钟离心1分钟后观察结果，

抗A血型试剂应与A