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siRNA干扰ADAR1表达对小鼠混合淋巴细胞

培养的影响

作者：蔡磊，霍斌亮，张巍，张福琴，赵青川

【关键词】淋巴细胞培养试验,混合；RNA干扰；ADAR1基因；

siRNA；排斥反应

EffectofsiRNAmediatedsilencingofADAR1geneonmixed

mouselymphocyteculture

【Abstract】AIM:Toinvestigatelymphocyteproliferationwhen

ADAR1issuppressedinmixedlymphocyteculturetest.METHODS:

PrimarylymphocytewasisolatedfromBalb/candC57mice.ADAR1

siRNAwastransferredintothelymphocytecellusingLipofectamine2000

beforetwosourcelymphocytesweremixedandcultured.Thecell

morphologywasobservedunderalightmicroscope,thecellproliferation

wascheckedusingcellcounting,trypanbluestainingandthecellviability

wasdeterminedbyMTTassay.TheADAR1mRNAwasdetectedby

RTPCR.RESULTS:WhentheADAR1expressionwassuppressedbythe

specificsiRNA,thelymphocyteproliferationwasinhibitedinmixed

lymphocyteculturetest.CONCLUSION:ADAR1hasapotentialrolein

theproliferationofmouselymphocyte.

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【Keywords】lymphocyteculturetest,mixed;RNAi;ADAR1;

siRNA;rejection

【摘要】目的:研究靶向ADAR1基因的siRNA在小鼠双向

混合淋巴细胞培养中所扮演的角色.方法：将化学合成的靶向ADAR1

基因的siRNA在Lipofectamine2000介导下转染处于双向混合淋巴细

胞培养试验中的小鼠淋巴细胞，观察转染组与未转染组细胞表型的变

化；通过RTPCR检测两组细胞中ADAR1mRNA的变化；细胞计数和

台盼蓝拒染法检测靶向ADAR1基因的siRNA对小鼠淋巴细胞增殖的

抑制作用；四甲基偶氮唑蓝（MTT）法评价转染化学合成的靶向

ADAR1基因的siRNA后对小鼠淋巴细胞增殖的抑制作用.结果：在

经典淋巴细胞混合培养试验中，转染靶向ADAR1基因的siRNA可以

明显降低小鼠淋巴细胞内ADAR1的表达，同时ADAR1siRNA对小鼠

淋巴细胞的增殖有抑制作用.结论：在经典淋巴细胞混合培养试验中,

化学合成的靶向ADAR1基因的siRNA能有效抑制ADAR1基因在小

鼠淋巴细胞中的表达，并对小鼠淋巴细胞增殖有抑制作用.

【关键词】淋巴细胞培养试验，混合；RNA干扰；ADAR1

基因；siRNA；排斥反应

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