pgex4t1原核表达载体的构建.docx

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2024-06-25 发布于河北
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pGEX-4T-CCL5原核表达载体的构建

摘要：原核表达载体的构建是很多生物实验的基础和必备工作，pGEX-4T-1是一种常用的表达载体。本项目旨在构建pGEX-4T-CCL5原核表达载体，为CCL5融合蛋白的纯化、CCL5单克隆抗体的制备提供材料。首先，运用PCR技术体外扩增了CCL5基因，并用BamHI、XhoI双酶切pGEX-4T-1载体。然后，将CCL5胶回收片段与pGEX-4T-1双酶切胶回收片段连接，转化大肠杆菌DH5α感受态细胞并涂布在含有Amp的培养基上，在37℃条件下培养12h。最后挑选克隆进行菌落PCR、双酶切鉴定及测序分析。菌落PCR、双酶切鉴定及测序结果证