2023年初级检验技师微生物检验讲义微生物检验概述.doc

微生物检查概述

临床微生物检查即诊断微生物学，是在医学微生物学的范畴内，侧重研究感染性疾病快速、准确地检出病原体的策略与方法，为临床诊断提供依据，并指导进一步合理用药和防止感染继续扩散的学科。

临床细菌实验室的重要工作是从临床标本中分离出病原菌并进行准确鉴定，同时指导临床合理应用药物，为临床诊断、治疗、预后和流行病学调查以及医院内感染的监控提供可靠的依据。

一、临床微生物检查的目的和规定

（一）临床微生物检查的目的

1.为临床感染性疾病的诊断提供病原学依据。

2.为临床感染性疾病的治疗提供参考用药的信息。

3.为医院感染提供病原微生物及其耐药性动态信息。

4.改善或更新临床微生物检查的方法。

（二）临床微生物学检查的规定

1.快速、准确地提出检查报告。

2.检查人员必须有较丰富的微生物学基础知识和纯熟、对的的操作技能，必须养成有菌观点和无菌操作的习惯。

3.临床微生物检查必须进行全面质量控制，并参与和接受质量控制考核。

4.重视实验室消毒灭菌工作。

（三）诊断实验的选择原则

1.选择有鉴定价值的实验

要对两种细菌进行鉴定，须选择一项两种菌呈现截然不同结果的实验，即一种菌呈现阳性（阳性反映的菌株阳性率须大于90%），另一种菌为阴性（阴性反映的菌株阳性率应小于10%），这项实验才有鉴定价值。否则，就没有鉴定价值。

2.选择简易、快速、方便的实验

（1）鉴定一种细菌也许有多种特异的方法，只选择其中一或两种达成目的即可，多选无意义。如金黄色葡萄球菌只选较简朴的凝固酶实验就足够了。

（2）选择操作简便、快速的方法。

（3）选用复合培养基，一次操作可同时看几个生化反映，如克氏双糖铁（KIA），动力靛基质脲酶（MIU）等。

3.综合考虑实验的敏感性和特异性

敏感性=所有阳性结果数／所有感染病人数，实验敏感性越高，假阴性结果就越少。特异性=阴性结果总数／未感染病人数，特异性越高，假阳性结果越少。实验的敏感性和特异性是互相联系的，实验的敏感性增长，会使特异性下降，反之亦然。

二、标本的采集和运送

对感染性疾病进行病原检查和鉴定，须通过采集患者的标本，经系列实验，才干获得明确的病原学诊断。标本质量直接影响诊断结果，不妥的标本可导致假阴性、假阳性结果的出现，因此，在标本采集、送检、保存等各个环节都要规范操作，严格控制，是保证实验结果准确可靠的前提。

（一）标本采集的一般原则

1.初期采集

最佳是病程初期、急性期或症状典型时，并且必须在使用抗生素或其他抗菌药物之前采集。

2.无菌采集

采集的标本应无外源性污染。在采集血液、脑脊液、胸腔积液、关节液等无菌标本时，应严格进行无菌操作；对于与外界相通的腔道，如窦道标本应由窦道底部取标本，采集的标本均应盛于无菌容器内。

3.根据目的菌的特性

厌氧菌、需氧或兼性厌氧菌，以及L型菌采用的方法不同。

4.采集适量标本

采集量不应过少，并且要有代表性，同时有些标本还要注旨在不同时间采集不同部位标本。

5.安全采集

采集标本时不仅要防止皮肤和黏膜正常菌群对标本的污染，同时也要注意安全，防止传播和自身感染。

（二）标本的解决

一些对环境敏感的细菌如脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌和流感嗜血杆菌等应保温并立即送检，而其他所有的标本采集后最佳在2h之内送到实验室。若不能及时送检，标本应置于一定环境中保存。一般情况下，用于细菌培养的标本保存时间不应超过24h。

厌氧性标本应放在专门的运送瓶或试管内运送，有时可直接用抽取标本的注射器运送。

病人标本中也许具有大量致病菌，不管标本运送距离远近，都必须注意安全防护。标本切勿污染容器的瓶口和外壁，容器必须包装好，防止送检过程中倒翻或碰破流出。对于烈性传染病标本运送时更要特别严格，必须按规定包装，由专人运送。

三、微生物检查

临床微生物学实验室接到标本后应立即进行微生物检查。重要涉及直接镜检、检测特异性抗原或病原体成分、进行分离培养和鉴定、体外药敏实验等，各种检查方法的比较见表5-9-1。

表5-9-1微生物检查方法、判断和速度

方法

鉴定类型

速度

直接镜检

初步诊断

5～10min

免疫荧光（直接法）

快速诊断

1～2h

乳胶凝集

快速诊断

15～30min

对流免疫电泳

快速诊断

2h

气-液相色谱

鉴定

1.5～2h

PCR

快速诊断

数小时

DNA探针

诊断、鉴定

1～3天

微量鉴定系统

鉴定

3～6h

常规法

拟定诊断

数天或以上

（一）直接镜检

标本经涂片、染色、镜检，有些标本如尿液、脑脊液等通过离心浓缩后镜检，其初步结果对疾病诊断有参考价值。直接镜检对于拟定进一步检出环节及鉴定方法也很有