免疫原和抗血清制备技术.pptx

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免疫原和抗血清制备技术;第一节免疫原制备;绵羊红细胞制备流程图;细菌细胞抗原制备流程图;起源:组织和细胞,其成份比较复杂。

1.组织和细胞成份混合抗原制备

2.蛋白质抗原制备

3.核酸抗原制备

4.类脂多糖抗原制备

5.免疫球蛋白片段制备

6.纯化抗原判定;组织和细胞成份混合抗原制备程序;细胞破碎技术及评价;惯用酶类:溶菌酶、纤维素酶、蜗牛酶等;2.冻融法;3.超声破碎法;4.表面活性剂处理;蛋白质抗原制备;1.超速离心法;2、选择性沉淀法;3.凝胶层析法(凝胶过滤法);4.离子交换层析法;5.亲和层析法(亲和色谱);正常细胞

+;核酸抗原制备;类脂多糖抗原制备;免疫球蛋白片段制备;酶水解免疫球蛋白示意图;1.氧化法:优点是切开后,肽链不能重新

形成二硫键、便于肽链纯化;

缺点是色氨酸侧链轻易被破坏。

;纯化抗原判定;蓝色;理化性质判定;垂直电泳;3.纯度判定;三、半抗原免疫原制备;载体类型;半抗原-载体连接方法1;混合;半抗原-载体连接方法3;半抗原-载体连接方法4;四、佐剂;(二)惯用佐剂种类和制备;2.明矾佐剂;作用大于不完全佐剂

局部形成肉芽种和溃疡

不能用于人体;4.佐剂应用标准和评价;应用佐剂缺点;第二节免疫血清制备;一、免疫动物选择;二、免疫方法;三、动物采血法;第三节抗体纯化和判定;一、抗体特异性纯化;二、特异性IgG类抗体纯化;三、特异性抗体判定;第四节单克隆抗体技术;;二、单克隆抗体应用

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