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LightCycler 480中文操作说明
罗氏医学仪器公司/应用科学部门
February 2008
目录
一.
启动机器与软件
3
二.
软件设定---开启新实验
5
三.
样品编辑
9
四.
结果分析
12
五.
报告
18
六.
入)
数据转移至其它计算机(数据输出与输
19
七.
使用者管理
19
一.启动机器与软件
启动机器
机器主开关位于机器右后方。
机器正面两个警示灯代表机器状态。待警示灯(右)由闪烁橘色灯转变成稳定橘色灯,警示灯(左)由橘色转变成绿色(约三分半钟),表示机器已经启动完成。
左警示灯
左警示灯
右警示灯
机器状态
橘
*闪烁*
橘*闪烁*
正在初始化
绿
橘
机器启动完成
96/384孔盘还未放入
绿
橘*闪烁*
96/384孔盘正在放入中
绿
绿
机器启动完成
96/384孔盘已经放入
绿
绿*闪烁*
绿*闪烁*
实验进行中
按压机器正面上唯一的按钮,放入已经封膜完成之96或384孔盘。放置完成后,左右两警示灯都呈现绿色。
启动软件
开启计算机,并以正确的使用者名称与密码登入Windows。Username:OPERATOR
Password:LC480
开启LightCycler480软件,并输入正确的使用者与密码。
二.软件设定--开启新实验
设定新实验
软件开启后,会进入主画面。点选“NewExperiment”。
出现实验设定窗口。任何时候需要回主画面的话,点选画面右边的按钮。
设定实验
若要套用设定好的实验步骤(Template),请跳至6.。
若要套用设定好的实验步骤(Template),请跳至6.。
在实验设定画面上方,先选择适当的DetectionFormat。选项包含:
另外可再点选“Customize”勾选所需的滤片组合。
输入反应体积:96wellplate围为10-100ul,而384wellplate围为5-20ul。
设定实验步骤(Program)
设定program,包含有Pre-incubation,Amplification(PCR),Meltingcurve(optional)与Cooling。利用『+』与『-』增加或删除步骤。
设定循环数目(Cycle)与分析模式。通常Amplification(PCR)program设定成『Quantification』,而MeltingCurveprogram设定成『MeltingCurve』。
设定详细温度变化(依照不同实验方法与设计而有所不同)
点选各个program即可设定详细温度变化步骤,请根据产品说明书来设定,利用『+』与『-』增加或删除步骤。需要设定的参数包含Target(℃)目标温度,AcquisitionMode(荧光侦测模式),Hold(hh:mm:ss)停留时间。RampRate(℃/s)为升降温速度,围如下:
RampRate(℃/s) Heatingup Coolingdown
96-well
Block
1.0
–4.4
/s
℃
1.0
–2.2℃
/s
384-well
Block
1.0
–4.8
/s
℃
1.0
–2.5℃
/s
若设定温度低于
若设定温度低于
50℃,请把 RampRate 调整成 1.5℃/s(96
well)或2.0℃/s(384well)。
将实验步骤储存成『Template』以便下次进行套用。点选左下角“SaveAsTemplate”即可把此步骤储存起来。
若要进行套用时,请直接点选窗口左下角“ApplyTemplate”,选择欲套用之实验步骤即可。
设定完成后点选“StartRun” 开始进行实验。
跳出档案储存窗口,请输入欲储存之文件名称。
实验进行中会进入另一个Data
实验进行中会进入另一个Data窗口,窗口下方按键功能如下:
EndProgram:结束此Program,进入下一个Program。
? +10Cycles:实时增加循环数目。
AbortRun:马上结束此实验,请注意,若按此键,则此次实验的
结果将不储存。
三.样品编辑
将样品分群
点选窗口左边的 “SubsetEditor”。
点选“New”新增新的群组,并将其命名。
利用鼠标选取此群组之样品位置,点选窗口右下角“Apply”,此时被选取的样品位置会呈现实心的蓝色,如下图。
以此方式依序将所有样品群组编辑完毕。
样品必须分群才能够独立分析,但是样品是否分群并不影响样品的Cp值。
编辑样品
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