微生物的选择培养和计数+高二下学期生物人教版（2019）选择性必修3.pptxVIP

第1章第2节二微生物的选择培养和计数

1分离特定种类的微生物实验室分离微生物的原理；选择培养基的概念。二微生物的选择培养和计数2对微生物进行计数稀释涂布平板法的步骤；微生物计数的方法。

资料PCR是体外扩增DNA片段的聚合酶链式反应，此项技术要求使用耐高温的DNA聚合酶。1973年，科学家从美国黄石国家公园的热泉中筛选出水生栖热菌，进而从这种菌中提取出耐高温的DNA聚合酶。任务一分离特定种类的微生物

1、水生栖热菌被筛选出来的条件是什么？提示水生栖热菌能在70～80℃的高温条件下生存，而绝大多数微生物在此条件下不能生存。2、这对实验室筛选微生物有什么启示？提示提供有利于目的菌生长的条件（包括营养、温度和pH等），同时抑制或阻止其他微生物的生长。任务一分离特定种类的微生物

选择培养基在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。任务一分离特定种类的微生物

现学现用一：地球上的植物每年产生的纤维素超过70亿吨，其中40%~60%能被土壤中某些微生物分解利用，这是因为它们能够产生纤维素酶。对这些酶的研究与应用，使人们能够利用秸秆等生产酒精，用纤维素酶处理服装面料等。任务一分离特定种类的微生物

1）你打算到什么环境中去寻找纤维素分解菌？提示纤维素分解菌大多数分布在富含纤维素的环境中，寻找纤维素分解菌时，可以选择纤维素丰富的环境，如树林中多年落叶形成的腐殖土等。任务一分离特定种类的微生物

2）有同学说，可以把滤纸埋在土壤中，一段时间后，再从已腐烂的滤纸上筛选纤维素分解菌。提示这是人工设置适合纤维素分解菌生存的环境，腐烂的滤纸上很可能有纤维素分解菌。任务一分离特定种类的微生物

现学现用二：尿素含氮量高，是一种重要的氮肥。尿素施入土壤后，会被土壤中的某些细菌分解成氨，氨再转化为NO??、NH4+等被植物吸收。这些细菌能合成脲酶，脲酶催化尿素分解产生氨，氨可作为细菌生长的氮源。任务一分离特定种类的微生物

1）如何筛选能分解尿素的细菌？提示设计一种选择培养基，用尿素作为唯一氮源，可以将分解尿素的细菌分离出来。2）怎么证明选择培养基具有选择作用？提示设置一个完全培养基作为对照，若完全培养基上生长的菌落数多于该选择培养基，则该培养基具有选择作用。任务一分离特定种类的微生物

1、稀释涂布平板法任务二对微生物进行计数

1、稀释涂布平板法任务二对微生物进行计数

1、稀释涂布平板法任务二对微生物进行计数

1）设置空白对照组的目的是什么？提示检测培养基灭菌是否彻底，保证实验结果的准确性。2）稀释涂布平板法的统计原理？提示当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。任务二对微生物进行计数

①为了保证结果准确，一般选择菌落数在30-300的平板进行计数。②为了增强实验的说服力，应至少对3个平板进行重复计数，然后求出平均值。③分析实验结果时，如果重复组结果相差太大，表示操作有误，需要重新实验。任务二对微生物进行计数

3）稀释涂布平板法统计的细菌数量准确吗？提示稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌的实际数目少，这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上的观察到的只是一个菌落。任务二对微生物进行计数

4）如何从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数？提示每克样品中的菌落数=（C÷V）×MC：某一稀释度下平板上生长的平均菌落数V：涂布平板时所用的稀释液的体积M：稀释倍数任务二对微生物进行计数

（2020年全国卷I节选）实验中初步估测摇瓶M中细菌数为2×107个/mL，若要在每个平板上涂布100μL稀释后的菌液，且保证每个平板上长出的菌落数不超过200个，则至少应将摇瓶M中的菌液稀释_____________倍。提示每克样品中的菌落数=（C÷V）×M2×107=（200÷0.1）×MM=1×104任务二对微生物进行计数1×104

2、显微镜直接计数提示显微镜直接计数不能区分死菌与活菌，因此统计的结果一般是活菌数和死菌数的总和，统计结果往往比实际值偏大。任务二对微生物进行计数

1、允许特定种类微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。2、制备以尿素作为唯一氮源的选择培养基是筛选分解尿素细菌的基础。3、可以利用稀释涂布平板法和显微镜直接