《给排水生化技术》课件——8.3水中总大肠菌群的测定.pptxVIP

导语

同学们，水的微生物学检验，特别是肠道细菌的检验，在保证饮水安全和控制传染病上有着重要意义，同时也是评价水质状况的重要指标。本次课我们来学习总大肠菌群的测定方法。

一、实验目的

二、实验原理

大肠菌群：是指在37℃24h内能发酵乳糖、产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌的总称。

二、实验原理

通过初发酵、培养分离、复发酵三个试验过程的检验，根据证实为总大肠菌群阳性的管数，查MPN检索表，报告每100mL水样中的总大肠菌群MPN值。如发酵管均为阴性，可报告未检出总大肠菌群。

二、实验原理

二、实验原理

三、实验器材

自来水样。

培养基：

乳糖蛋白胨发酵管培养基（内有倒置小套管）。

浓乳糖蛋白胨发酵管培养基（内有倒置小套管）。

伊红美蓝琼脂培养基。

溶液和试剂：革兰氏染液、无菌水等。

仪器和设备：要有灭菌水样瓶、灭菌移液管、灭菌试管、接种环、接种针、显微镜、载玻片、无菌培养皿、镊子、烧杯、培养箱等。

四、实验步骤

1.初发酵试验

在5支装有10mL浓乳糖蛋白胨发酵管中各加入水样10mL。摇匀后，37℃培养24h，与空白培养基对照观察产酸产气情况，37℃培养24h，小套管中有气体形成，并且培养基浑浊，颜色改变，说明水中存在大肠菌群，为阳性结果。

产酸不产气为可疑结果，继续培养至48h。才能确定是否是大肠菌群。48h后仍不产气的为阴性结果。

四、实验步骤

2.培养分离

将24h培养后产酸产气和48h培养后产酸产气的发酵管，分别划线接种于伊红美蓝琼脂平板上，再于37℃下培养18～24h，挑选具大肠菌群典型特征的菌落（深紫黑色有金属光泽，紫黑色不带或略带金属光泽，淡紫红色中心颜色较深），挑取其一小部分进行涂片，革兰氏染色，镜检。

四、实验步骤

四、实验步骤

3.复发酵

经上述染色、镜检确认为革兰氏阴性无芽胞杆菌的菌落，则挑取该菌落的另一部分，重新接种于装有10mL乳糖蛋白胨发酵管（内有倒置小套管）中，每管可接种来自同一初发酵管的同类型菌落1～3个，37℃培养24h，试验结果若产酸产气，即证实有大肠菌群存在。

五、报告结果

统计经证实有大肠菌群存在的复发酵管的阳性管数，查表2得到相应的MPN数，填入表中报告每100mL水样中的大肠菌群数。

五、报告结果

2.据你的实验结果，水样是否合乎饮用标准？