【同步学案】2.2动物细胞工程(课件版共71张PPT).ppt.pptx

2.2动物细胞工程;;;一、动物细胞培养

1.概念

动物细胞培养是指从动物体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后在适宜的培养条件下,让这些细胞生长和增殖的技术。

2.地位

动物细胞工程常用的技术包括动物细胞培养、动物细胞融合和动物细胞核移植等,其中动物细胞培养是动物细胞工程的基础。;3.动物细胞培养的条件

(1)营养。

细胞在体外培养时,培养基中应含有细胞所需要的各种营养物质。在使用合成培养基时,通常需要加入血清等一些天然成分。;(2)无菌、无毒的环境。

①对培养液和所有培养用具进行灭菌处理;

②在无菌环境下进行操作;

③培养液还需要定期更换,以便清除代谢物,防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。;(3)温度、pH和渗透压。

维持细胞生存必须有适宜的温度。哺乳动物细胞培养的温度多以(36.5±0.5)℃为宜。多数动物细胞生存的适宜pH为7.2~7.4。此外,渗透压也是动物细胞培养过程中需要考虑的一个重要环境参数。

(4)气体环境。

O2是细胞代谢所必需的;CO2的主要作用是维持培养液的pH。;4.动物细胞培养的过程;5.相关概念

(1)细胞贴壁:细胞悬液中分散的细胞往往贴附在培养瓶的瓶壁上的现象。大多数细胞贴壁生长。

(2)接触抑制:当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞通常会停止分裂增殖的现象。

(3)原代培养:分瓶之前的细胞培养,即动物组织经处理后的初次培养。

(4)传代培养:分瓶后的细胞培养。;6.干细胞培养及其应用

(1)胚胎干细胞存在于早期胚胎中,具有分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞,并进一步形成机体的所有组织和器官甚至个体的潜能。

(2)成体干细胞具有组织特异性,只能分化成特定的细胞或组织,不具有发育成完整个体的能力。;微点拨1不是所有细胞都存在接触抑制,如癌细胞增殖时不存在接触抑制,在培养瓶中可以形成多层细胞。

微思考1植物组织培养的原理是细胞的全能性,动物细胞培养能体现细胞的全能性吗?

提示:植物组织培养的结果一般是形成完整的植株,体现了植物细胞的全能性。而动物细胞培养的目的是获得细胞或细胞产物,没有发生细胞分化,其过程不能体现细胞的全能性。;二、动物细胞融合技术

1.概念

动物细胞融合技术就是使两个或多个动物细胞结合形成

一个细胞的技术。

2.结果

融合后形成的杂交细胞具有原来两个或多个细胞的遗传信息。;3.诱导方法

(1)物理法:电融合法等。

(2)化学法:PEG融合法等。

(3)生物法:灭活病毒诱导法等。

4.意义

细胞融合技术突破了有性杂交的局限,使远缘杂交成为可能。;5.应用

成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和培育生物新品种等的重要手段,特别是利用动物细胞融合技术发展起来的杂交瘤技术,为制造单克隆抗体开辟了新途径。

微思考2动物细胞融合完成的标志是什么?

提示:动物细胞融合完成的标志是细胞核融合。;微训练下列有关动物细胞融合的叙述,错误的是()

A.使远缘杂交成为可能

B.杂交细胞具有原来两个或多个细胞的遗传信息

C.其基本原理是细胞膜的选择透过性

D.为制造单克隆抗体开辟了新途径

答案:C

解析:动物细胞融合的原理是细胞膜具有流动性,C项错误。;三、单克隆抗体及其应用

1.传统的抗体制备

(1)方法:向动物体内反复注射某种抗原,使动物产生抗体,然后从动物血清中分离所需抗体。

(2)缺点:产量低、纯度低、特异性差。;2.单克隆抗体制备原理

(1)B淋巴细胞:每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体,但在体外培养条件下,一个B淋巴细胞是不可能无限增殖的。

(2)骨髓瘤细胞:在体外培养条件下,能无限增殖,但不能产生抗体。

(3)杂交瘤细胞:将一种B淋巴细胞与能在体外大量增殖的骨髓瘤细胞融合,得到的杂交瘤细胞,既能迅速大量增殖,又能产生抗体。;3.单克隆抗体制备过程;微点拨2制备单克隆抗体时,要对小鼠注射抗原进行免疫。B淋巴细胞要经过免疫过程,即受抗原刺激后才能增殖、分化为有特异性免疫功能的浆细胞,进而产生相应的抗体,所以与骨髓瘤细胞融合的B淋巴细胞实际上是浆细胞。;四、动物体细胞核移植技术和克隆动物

1.概念

动物细胞核移植技术是将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中,使这个重新组合的细胞发育成新胚胎,继而发育成动物个体的技术。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。;2.类型

哺乳动物核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植。动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植,因为动物胚胎细胞分化程度低,表现全能性相对容易,而动物体细胞分化程度高,表现全能性十分困难。;3.过程;微点拨3克隆动物的亲本有3个,分别是供体(提供细胞核)、提供去核卵母细胞的动物和代孕母体。克隆动物的绝大部分性状与供体动物相同,少数性状与提供去核卵母细胞的动物相同,与代孕动物的性状无遗传关系。克隆动物的产生