天然药物化学 课件 项目2 天然药物化学成分的色谱分离技术.pptx

天然药物化学

;第二章天然活性成分的提取与分离;第二章天然活性成分的提取与分离;学习目标：

知识目标:

掌握吸附色谱、分配色谱基本原理操作技术及应用。

熟悉熟悉离子交换色谱、凝胶色谱的基本原理及应用。

了解了解大孔吸附树脂色谱、高效液相色谱的基本原理及应用。

技能目标:

熟练进行薄层色谱的基本操作，会纸色谱和柱色谱的基本操作。

素质目标:

培养学生严谨的工作态度和一丝不苟的职业精神。;项目二色谱分离技术;项目二色谱分离技术;项目二色谱分离技术;（一）吸附色谱的原理:吸附色谱是利用吸附原理，即利用作为固定相的吸附剂对中药混合物中各成分吸附能力的大小不同，而使混合物中各成分得以分离的色谱方法。

吸附能力：固体表面的作用力、氢键络合、静电引力、范德华力等。

吸附剂对各成分吸附能力大小主要取决于：

1.吸附剂本身的结构和性质;

2.被吸附成分的结构和性质;

3.展开剂的极性大小。;(二)吸附色谱的三要素:吸附剂、展开剂及被分离成分。

1.吸附剂：（1）种类:包括亲水性吸附剂、亲脂性吸附剂。

亲水性吸附剂：硅胶、氧化铝、聚酰胺、氧化镁、碳酸钙和硅藻土等。

亲脂性吸附剂：常用的是活性炭。

（2）吸附能力:亲水性吸附剂的吸附能力与含水量有关，含水量越大，吸附能力越弱。

活化：除去吸附剂所含的水分，使其活性增高，称为吸附剂的活化。

脱活化：在吸附剂中加入水分，降低其吸附活性称为脱活化。

;吸附剂的活性级别：根据吸附剂中的含水量，其吸附能力可分为５个级别（Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级和Ⅴ级）。活性级别越小，含水量越少，吸附能力越强；活性级别越大，含水量越多，吸附能力就越弱。

（3）常用吸附剂：

硅胶：硅胶为极性吸附剂，极易吸水。含水量在17%以下才能作为吸附剂，活化温度一般在105~110℃，30min。常用的有硅胶H、硅胶Ｇ、硅胶GF254。

氧化铝：氧化铝为极性吸附剂，吸附能力比硅胶稍强。适宜分离碱性成分。用稀硝酸或稀盐酸处理氧化铝，适用于酸性成分的分离。色谱用氧化铝有碱??（pH值为9.0）、中性（pＨ值为7.5）和酸性（pＨ值为4.0）3种。

聚酰胺：是一类高分子物质，不溶于水及有机溶剂，对酸稳定性差，对碱较稳定。

;2.展开剂：

展开剂解吸附能力大小与吸附剂和被分离成分的性质有关。亲水性吸附剂，解吸附能力与极性成正比。即分成分极性大，展开剂的极性也要大，否则被分离成分就不能随着展开剂移动而分离。反之，被分成分的极性小，应选择极性小的溶剂作展开剂。

常用溶剂极性大小顺序：

石油醚＜苯＜乙醚＜三氯甲烷＜乙酸乙酯＜丙酮＜乙醇＜甲醇＜水

3.被分离成分：亲水性吸附剂，遇到待分物质极性大，被吸附的牢固，解吸附就较难，展开速度慢。反之，吸附力弱，解吸附就容易。

;化合物极性判断原则如下：

分子中母核相同，极性基团越多，极性越大；分子中双键及共轭双键越多，极性越大；同系物中，分子量越小，极性越大；在同一母核中不能形成分子内氢键的化合物比能形成分子内氢键的化合物的极性大。

常见的取代基极性大小：

烷基（-CH3）＜烯基（-CH=CH-）＜醚基（-OCH3）＜硝基（-NO2）＜二甲胺基[-N（CH3）2]＜酯基（-COOR）＜酮基（-CO）＜醛基（-CHO）＜巯基（-SH）＜胺基（-NH2）＜酰胺基（-NH-COCH3）＜醇羟基（-OH）＜酚羟基（Ar-OH）＜羧基（-COOH）

;（三）吸附色谱的操作：吸附色谱依据操作方式的不同，吸附色谱分为薄层色谱及柱色谱。

1.吸附薄层色谱操作技术：

薄层板的制备：(湿法铺板:加粘合剂的板为硬板；干法铺板：不加粘合剂的板为软板)→点样→展开→显色→计算比移值。

2.吸附柱色谱的操作步骤：

装柱（包括干法装柱和湿法装柱两种）→上样（将试样溶于少量的洗脱剂中加到色谱柱顶端的操作）→洗脱(将洗脱剂不断加入色谱柱进行分离的操作过程)→收集。

;项目二色谱分离技术;第二节聚酰胺吸附色谱;第二节聚酰胺吸附色谱;第二节聚酰胺吸附色谱;项目二色谱分离技术;第三节分配色谱;第三节分配色谱;第三节分配色谱;第三节分配色谱;第三节分配色谱;第三节分配色谱;第三节分配色谱;项目二色谱分离技术;第四节离子交换色谱（IEC）;第四节离子交换色谱（IEC）;第四节离子交换色谱（IEC）;项目二色谱分离技术;第