紫外分光光度法测定Vc含量.docVIP

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紫外分光光度法测定Vc含量

1.实验原理

维C在紫外光区(200-400nm)显示特征的吸收谱带,最大光吸收(λmax)为245nm。因此可以用标准曲线法在245nm测样品吸光度,测得维C含量。

2.实验试剂

(I)1%的HAc溶液

(2)100ug/ml的Vc标准贮备液:准确称取0.010g的Vc,用1%的HAc定容至100mL。

(3)Vc标准使用液:吸取贮备液5.00mL,用1%HAc稀释至250mL(现用现配)。

(4)比色皿清洗剂

3.实验步骤

3.1Vc的提取

称取剪碎混匀的新鲜样品0.5~1.0g加酸研磨,多次过滤至50ml容量瓶中定容。吸取10ml待测液溶液于试管。

3.2标准曲线的绘制

分别吸取0.00、1.00、2.00、4.00、8.00、10.00ml维生素C标准溶液于10ml比色管中用酸定容,用水稀释成一系列浓度分别为0.0、10、20、40、80、100μg/mL维生素C标准溶液,分别测出其吸光度。然后以浓度为横坐标,以相应的吸光度为纵坐标绘制出标准曲线。该曲线是经过原点的一条直线,可求出该曲线的斜率。

3.3Vc的测定

波长245nm处测定。

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