GBT-化学品 EASZY试验 利用转基因 tg（cyp19a1b：GFP）斑马鱼胚胎通过雌激素受体检测内分泌活性物质及编制说明.pdf

ICS13.300

CCSA80

中华人民共和国国家标准

GB/TXXXXX—XXXX

化学品EASZY试验利用转基因tg

（cyp19a1b：GFP）斑马鱼胚胎通过雌激素

受体检测内分泌活性物质

Chemicals-EASZYassay:Detectionofendorineactivesubstances,acting

throughestrogenreceptors,usingtransgeictg（cyp19a1b:GFP）zebrafish

embryos

2024-5-24

（本征求意见稿完成时间：）

XXXX-XX-XX发布XXXX-XX-XX实施

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目次

1范围1

2规范性引用文件1

3术语、定义和缩略语1

4试验原理3

5受试物信息3

6能力验证化学品4

7试验准备5

8试验程序7

9数据分析和结果评价9

10质量保证与质量控制9

11结果报告9

附录A（资料性）tg（cyp19a1b:GFP）基因构造11

附录B（资料性）通过诱导GFP来测定化学品诱发雌激素活性的通路12

附录C（资料性）EASZY试验流程概述14

附录D（资料性）EASZY试验成像分析16

附录E（资料性）96h后转基因斑马鱼体内荧光成像17

附录F（资料性）转基因斑马鱼的体内成像：广角荧光显微镜18

附录G（资料性）转基因斑马鱼的体内成像：ImageJ中图像分析宏的使用19

附录H（资料性）数据报告和分析24

附录I（资料性）数据统计分析的流程图30

附录J（资料性）EASZY试验中的浓度-效应关系示例31

参考文献38

I

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前言

本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由全国危险化学品管理标准化技术委员会（SAC/TC251）提出并归口。

本文件起草单位：

本文件主要起草人：

II

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引言

EASZY试验是一种基于机制的体内筛选试验，旨在通过诱导cyp19a1b启动子驱动的绿色荧光蛋白

（GFP）的表达，检测通过雌激素受体作为激动剂的内分泌活性化学物质。EASZY试验可用于检测化学物

质对转基因tg（cyp19a1b：GFP）斑马鱼胚胎在暴露96小时后的雌激素活性。附录A描述了用于建立转基

因品系的基因结构。

cyp19a1b基因编码大脑芳香化酶，是一种负责