血、尿液尿素氮（BUN）测定 血、尿液肌酐（Cr）测定.docx

血、尿液尿素氮（BUN）测定

实验原理

VitrosBUN/UREA试剂是一种干燥，多涂层的，在透明的聚合物支撑基片上涂有分析成份的化学干片。

将一滴患者样品滴于干片上，分布层会使之均匀地分布。水和非蛋白质成份进入下面的试剂层，与尿素酶反应生成氨。半透膜只允许氨进入呈色反应层，与指示剂发生反应。经过一段固定的孵育时间后，通过测定呈色剂的反射强度可间接求出尿素氮的含量。

测定方式：比色法

波长：670nm

测试时间和温度：37℃约５分钟

反应过程：

尿素酶

非蛋白质成份＋水—————→氨+二氧化碳

氨＋氨指示剂—————→呈色剂

2.标本：

2.1病人准备：血清无特殊要求。要留取24小时尿样。

2.2样品类型：血清；肝素锂/钠和EDTA抗凝血浆。定时收集的，稀释后的尿样。

2.3标本采集与处理：

2.3.1血清和血浆样品

特别要注意的是：血清；肝素锂/钠和EDTA抗凝血浆；不要用氟化钠作防腐剂，因为氟会抑制尿素酶。样品采集后4小时内要离心标本，吸出血清。处理样品时要将其当成生物污染品。

2.3.2尿液样品

定时或随时采集的尿液，特别要注意的是：不能使用以下防腐剂：冰醋酸，浓盐酸，硼酸，硼粉或甲酸钠硼酸，样品在测试前要冷藏。测试前将1份样品加20份试剂级别的水进行稀释。将测试结果乘以21，就得到原始样品中尿素氮的浓度。冷藏的样品不能立即测试。处理样品时要将其当成生物污染品。

3.标本的存放：血清、血浆室温下最多1天；4～8℃冷藏最多5天；-18℃冷冻保存可长达6个月。尿液样品在测试前要冷藏。

4.标本的运输：样品要放在带盖的容器内以防污染和蒸发。

5.标本拒收的标准：污染、抗凝剂、防腐剂不符合要求，标本放置时间过长。

6.试验材料：

6.1测试BUN所需的物品包括：Vitros化学定标物Kit1；Vitros特制质控液；Vitros7%BSA稀释液。

强生厂家提供原装进口，试剂盒外包装上标明了测试项目名称，试剂标签代码，有效期限和储藏温度。

6.1.1试剂组成：干片成分：

反应成份有尿素酶和氨指示剂。其它成份有染色物质，粘合剂，缓冲剂，稳定剂，表面活性剂，螯合剂及交叉连接剂。干片标记：试剂盒外包装上标明了测试项目名称，试剂标签代码，有效期限和储藏温度。

6.1.2试剂准备：从冰箱中取出干片盒，在将干片盒打开封装并装入仪器内的干片储藏器之前必须使其达到室温状态18～28℃。因此从冰箱中取出的试剂盒至少要在室温下要放置60分钟，而冷藏的试剂盒至少要在室温下放置30分钟。去除内包装后立即将干片盒放入仪器的储藏器中。在试剂盒达到室温后24小时内必须将其装入仪器中。

6.1.3试剂稳定性与贮存

未开封的干片盒：存储在2～8℃或低于该范围。

在机内干片储藏器中的干片盒：在仪器上放置时间不能超过2周，否则要更换新试剂。当仪器关闭时间不超过2个小时时，可将干片盒留在储藏器中。出现以下情形要做质控检测：仪器关闭时间超过2小时；再次装载从仪器储藏器中取出的干片盒。

如果储藏正确，VitrosGLU干片可保质到包装盒上标明的有效期限。参见VITROS250干化学分析仪试剂稳定性及贮存.SOP文件。

6.1.4变质指示：超过有效期的试剂干片不能使用。

6.1.5注意事项：为避免干片盒打开以前其内包装受损，不能摔打干片盒；不要让尖利物刺入内包装。

6.2校准品：用Vitros化学定标物Kit1。血清，尿液和脑脊液都用相同的定标液，不过各自的SAVs值不同。有关标准液的配制，使用及保存的配制，保存和稳定的详情，可参阅VITROS250干化学分析仪校准品和质控品.SOP文件。

6.3质控品：使用Vitros特制的质控物品；CSF质控检测用Vitros液体质控。若使用其它的一些质控物品，当与别的GLU测试方法比较时就会出现差异，如：用人血清/血浆混合物分离制成的质控物品；含有高浓度防腐剂，稳定剂和其它化学添加剂的质控物品；乙烯乙二醇作稳定剂的质控物品不能使用。

有关质控液的配制，保存和稳定的详情，可参阅VITROS250干化学分析仪校准品和质控品.SOP文件。

7.仪器：美国强生厂家VITROS250全自动干式生化分析仪。具体测试程序请参阅操作手册的介绍。

8.操作步骤：将试剂复温后直接放入仪器，样品编程，仪器5分后自动打印结果。具体测试程序请参阅VITROS250操作手册.SOP。具体定标程序：参阅操作手册的相关章节内容。何时进行定标：——在维护和保养时更换了仪器的重要部件。——质控结果持续超出线性范围内时，详情参阅操作手册。——管理条例上指定的时间，在美国，