2.2.2动物细胞工程-动物细胞融合技术与单克隆抗体高二下学期生物人教版（2019）选择性必修3.pptx

第二章细胞工程第2节动物细胞工程第2课时动物细胞融合技术与单克隆抗体选必三P48授课教师：XXXWxW

植物体细胞杂交植物细胞融合植物组织培养有没有技术能让不同种动物的体细胞进行杂交，培育出及不同细胞的优势于一身的动物细胞呢？

1970年，有两位科学家做了一个人-鼠细胞融合的实验，以证明细胞膜上的蛋白质分子是运动的。回忆

一.动物细胞融合技术1.概念动物细胞融合技术(也称细胞杂交)就是使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。2.原理：动物细胞膜的流动性回顾：植物体细胞杂交的原理是：植物细胞膜的流动性、植物细胞的全能性3.结果：形成杂交细胞，即融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞。

一.动物细胞融合技术4.诱导方法：物理法：化学法：生物法：振动、离心法、电融合法聚乙二醇(PEG)融合法灭活病毒诱导法，如灭活的仙台病毒植物体细胞杂交的特有诱导方法：高Ca2+-高pH融合法；动物细胞融合的特有诱导方法：灭活病毒诱导法。【P48相关信息】灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力，但并不破坏它们的抗原结构。灭活病毒诱导细胞融合的原理是：病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。仙台病毒紫外线灭活丧失感染活性(不感染细胞)保留融合活性(诱导细胞融合)

【P49页旁栏思考】19世纪30年代，科学家曾在患肺结核、天花和麻疹等疾病的病人的病理组织中观察到多核细胞。如何解释这一现象?病人体内的病毒等诱导多个细胞融合形成了多核细胞。

5.过程：一.动物细胞融合技术动物细胞融合的过程包括细胞膜融合、细胞质融合和细胞核融合。其中细胞膜融合是细胞融合的先导，在细胞膜融合中体现出细胞膜具有一定的流动性，细胞融合的实质是核融合。动物细胞融合完成的标志是两个或多个细胞核融合为一个细胞核。灭活病毒诱导细胞融合过程：

6.意义：一.动物细胞融合技术突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能。7.实例：正在融合的鸡血细胞正在融合的淋巴细胞与骨髓瘤细胞

8.应用：一.动物细胞融合技术(1)成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和培育生物新品种等的重要手段。(2)用于制备______________。单克隆抗体9.动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较植物体细胞杂交动物细胞融合原理融合前处理诱导方法细胞膜的流动性、细胞的全能性细胞膜的流动性先除去细胞壁方法：先使细胞分散开方法：机械法、纤维素酶和果胶酶胰蛋白酶或胶原蛋白酶物理法：电融合法、离心法化学法：PEG融合法、高Ca2+-高pH融合法物理法：电融合法、离心法化学法：PEG融合法生物法：灭活病毒诱导法

一.动物细胞融合技术9.动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较植物体细胞杂交动物细胞融合过程结果应用意义克服了远缘杂交不亲和的障碍/实现远缘杂交，打破了生殖隔离，扩展了杂交的亲本组合。培育植物新品种主要用于制备单克隆抗体杂种植株杂交细胞细胞A、B?去壁?原生质体A、B?融合?融合的原生质体?再生出细胞壁?杂种细胞?植物组织培养(脱分化、再分化等)?杂种植株细胞A、B?融合?杂交细胞(?有丝分裂?多个相同杂种细胞)

时间成果19世纪30年代观察到肺结核、天花、水痘、麻疹等疾病患者的病理组织中有多核细胞1858年观察到正常组织、发炎组织以及肿瘤组织中的多核细胞现象。1875年第一个观察到脊椎动物（蛙类）的血液细胞发生融合的过程。1876年在无脊椎动物中发现了细胞合并现象。1962年日本学者冈田发现仙台病毒具有触发动物细胞融合的效应。1965年英国科学家证实了灭活的病毒可诱发动物细胞融合1974年华裔加拿大学者高国楠创立了聚乙二醇（PEG）化学融合法。1975年Kohler和Milstein成功地融合了小鼠B淋巴细胞和骨髓瘤细胞而产生能分泌稳定单克隆抗体的杂交瘤细胞。20世纪80年代发展出了电融合技术(1985年酵母原生质体电融合)【拓展】动物细胞融合技术的发展历史

随堂练习1．关于动物细胞融合的说法，不正确的是()A．动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程B．动物细胞融合后形成的具有两个动物细胞遗传信息的单核细胞称为杂交细胞C．常用的诱导动物细胞融合的方法有聚乙二醇、灭活的病毒诱导、电激、紫外线照射等D．细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能CC[常用的诱导动物细胞融合的方法有物理法——离心、振动、电激等；化学法——聚乙二醇(PEG)诱导；生物法——灭活的病毒诱导。紫外线照射不是诱导动物细胞融合的方法。]

20世纪90年代初，