1.2-基因工程的基本操作步骤(43张PPT).pptx

第一章基因工程;我们身边到底有哪些转基因食品？;黄金大米;关于转基因：崔永元PK方舟子;;Step1：获得目的基因;目的基因的序列已知;利用PCR技术扩增;模板的双链DNA解旋，形成单链DNA。;PCR：聚合酶链式反应;目的基因的序列未知;基因组文库VScDNA文库;基因组文库：一种生物的全部基因（国家图书馆）。cDNA文库：一种生物的部分基因（市图书馆）。;Step2：目的基因与载体连接;①用同一种限制性核酸内切酶分别切割目的基因和载体质粒，产生相同的粘性末端。;②用DNA连接酶将目的基因和载体连接在一起，形成重组DNA分子。;;基因表达载体的构建;Step3：将重组DNA导入受体细胞;（1）将目的基因导入植物细胞;转BT抗虫棉;基因枪法和花粉管通道法;（2）将目的基因导入动物细胞;（3）将目的基因导入微生物细胞;Step4：筛选含有目的基因的受体细胞;Step5：目的基因的表达和鉴定;分子杂交技术;个体生物学水平鉴定;剪切→拼接→导入→筛选→表达;例题：如下图所示，两个核酸片段在适宜的条件下，经X酶的催化作用，发生下述变化，则X酶是（）

A.DNA连接酶B.RNA聚合酶

C.DNA聚合酶D.限制酶;例题：基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的步骤是（）

A.人工合成目的基因

B.目的基因与运载体结合

C.将目的基因导入受体细胞

D.目的基因的检测和表达;基因工程的应用;一、基因工程与遗传育种;①优点：定向改造生物的遗传性状，克服远缘杂交不亲和的生殖障碍。

②缺点：操作复杂，难度大，转基因生物和转基因食品存在安全性问题。;用基因工程培育成功的“超级细菌”能分解石油中的多种烃类化合物，还能吞食转化汞和镉等重金属，分解DDT等毒害物质。;三、基因工程与疾病治疗;例题：下列有关基因工程操作的叙述中，正确的是（）

A.用同种限制酶切割载体与目的基因可获得相同的黏性末端

B.以蛋白质的氨基酸序列为依据合成的目的基因与原基因的碱基序列相同

C.检测到受体细胞含有目的基因就标志着基因工程操作的成功

D.用含抗生素抗性??因的质粒作为载体是因为其抗性基因便于与外源基因连接;例题：（2012·浙江）天然的玫瑰没有蓝色花，这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因B，而开蓝色花的矮牵牛中存在序列已知的基因B。现用基因工程技术培育蓝玫瑰，下列操作正确的是（）

A.提取矮牵牛蓝色花的mRNA，经逆转录获得互补的DNA，再扩增基因B

B.利用限制性核酸内切酶从开蓝色花矮牵牛的基因文库中获取基因B

C.利用DNA聚合酶将基因B与质粒连接后导入玫瑰细胞

D.将基因B直接导入大肠杆菌，然后感染并转入玫瑰细胞;例题：如图表示利用农杆菌转化法获得某种转基因植物的部分操作步骤。以下说法错误的是（）

A.利用含有四环素的培养基可将含Ⅱ的细菌筛选出来

B.Ⅲ是农杆菌，通过步骤③将目的基因导入植株

C.⑥可与多个核糖体结合，并可以同时翻译出多种蛋白质

D.①过程的完成需要限制酶和DNA连接酶的参与;例题：（2015·重庆）下列有关人胰岛素基因表达载体的叙述，正确的是（）

A.表达载体中的胰岛素基因可通过人肝细胞mRNA反转录获得

B.表达载体的复制和胰岛素基因的表达均启动于复制原（起）点

C.借助抗生素抗性基因可将含胰岛素基因的受体细胞筛选出来

D.启动子和终止密码子均在胰岛素基因的转录中起作用;长风破浪会有时，直挂云帆济沧海。努力，终会有所收获，功夫不负有心人。以铜为镜，可以正衣冠；以古为镜，可以知兴替；以人为镜，可以明得失。前进的路上，要不断反思、关照自己的不足，学习更多东西，更进一步。穷则独善其身，达则兼济天下。现代社会，有很多人，钻进钱眼，不惜违法乱纪；做人，穷，也要穷的有骨气！古之立大事者，不惟有超世之才，亦必有坚忍不拔之志。想干成大事，除了勤于修炼才华和能力，更重要的是要能坚持下来。士不可以不弘毅，任重而道远。仁以为己任，不亦重乎?死而后已，不亦远乎?心中有理想，脚下的路再远，也不会迷失方向。太上有立德，其次有立功，其次有立言，虽久不废，此谓不朽。任何事业，学业的基础，都要以自身品德的修炼为根基。饭疏食，饮水，曲肱而枕之，乐亦在其中矣。不义而富且贵，于我如浮云。财富如浮云，生不带来，死不带去，真正留下的，是我们对这个世界的贡献。英雄者，胸怀大志，腹有良策，有包藏宇宙之机，吞吐天地之志者也