第二章动物基因组学基础.pdfVIP

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文档名

(二)遗传标记概念的发展

□形态学标记

能用肉眼观察和识别的外部性状。例如,

动物的毛色、角形、耳型、体型、外貌等。此法

简单直观,但标记数目少、多态性低、易受环境

影响

□细胞遗传标记

主要是指染色体核型(染色体的数目、

大小、随体、着丝粒位置、核仁组织区等)、带

型和数量的变异。此法能反映出染色体结构和数

目的多态性,但由于这些变异往往带来有害的表

型效应,生物难以忍受

2

□免疫遗传标记

以动物的免疫学特征为标记,主要是红细胞抗原多态

性和白细胞抗原多态性

·红细胞抗原多态性——血型,以细胞表面的抗原而定

·白细胞抗原多态性——主要组织兼容性复合体(MHC)

,以白细胞表面的抗原而定

□生化遗传标记(蛋白质多态性标记)

同一种动物中,具有相同功能的蛋白质存在两种以

上的变异体,有些可以用电泳方法区分其中的差异

3

分子遗传标记

○分子遗传标记是以DNA多态性为基础的遗传标记,又

称DNA分子标记或多态性DNA标记。

○自20世纪70年代以来,随着分子生物学的发展,相继

建立了多种分子遗传标记检测技术,例如,RFLP、VNTR、

RAPD、AFLP、SNP等。

○分子遗传标记的特点:遗传多态性高;检测方法简单

快捷;遗传共显性,能分离出等位基因的三种基因型。

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二、分子遗传标记

(一)限制性片段长度多态性(restiction

fragmentlengthpolymorphism,RFLP)

○RFLP

RFLP是1980年建立的第一代分子遗传标记。

原理:用限制性内切酶切割不同个体的DNA时,如果

存在酶切位点的变化,就会产生长度不同的DNA片段,电

泳后用克隆探针检测时,就会出现泳动行为的改变。

基本过程:取得DNA样本——酶切——电泳——转移

至硝酸纤维膜上——DNA探针杂交——放射自显影

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图7-1Southern杂交过程

图7-1Southern杂交过程

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图7-2RFLP检测

图7-2RFLP检测7

○聚合酶链式反应(polymerase

chainreaction,PCR)

PCR是1985年建立的一种体外快速扩增特定基因或

DNA序列的方法。

原理:在反应温度为90—95℃时,DNA变性成为单链;

反应温度降至45—65℃时,两种引物与两条单链DNA退火而

配对结合;反应温度升至72℃左右时,在TaqDNA聚合酶作

用下,引物以单链DNA为模板逐步延伸成新的单链。“变性

——退火——延伸”这一循环完成后,DNA复制了一次,由

一个DNA分子成为两个DNA分子。

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图7-3

图7-3

DNA

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