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文档名
(二)遗传标记概念的发展
□形态学标记
能用肉眼观察和识别的外部性状。例如,
动物的毛色、角形、耳型、体型、外貌等。此法
简单直观,但标记数目少、多态性低、易受环境
影响
□细胞遗传标记
主要是指染色体核型(染色体的数目、
大小、随体、着丝粒位置、核仁组织区等)、带
型和数量的变异。此法能反映出染色体结构和数
目的多态性,但由于这些变异往往带来有害的表
型效应,生物难以忍受
2
□免疫遗传标记
以动物的免疫学特征为标记,主要是红细胞抗原多态
性和白细胞抗原多态性
·红细胞抗原多态性——血型,以细胞表面的抗原而定
·白细胞抗原多态性——主要组织兼容性复合体(MHC)
,以白细胞表面的抗原而定
□生化遗传标记(蛋白质多态性标记)
同一种动物中,具有相同功能的蛋白质存在两种以
上的变异体,有些可以用电泳方法区分其中的差异
3
□
分子遗传标记
○分子遗传标记是以DNA多态性为基础的遗传标记,又
称DNA分子标记或多态性DNA标记。
○自20世纪70年代以来,随着分子生物学的发展,相继
建立了多种分子遗传标记检测技术,例如,RFLP、VNTR、
RAPD、AFLP、SNP等。
○分子遗传标记的特点:遗传多态性高;检测方法简单
快捷;遗传共显性,能分离出等位基因的三种基因型。
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二、分子遗传标记
(一)限制性片段长度多态性(restiction
fragmentlengthpolymorphism,RFLP)
○RFLP
RFLP是1980年建立的第一代分子遗传标记。
原理:用限制性内切酶切割不同个体的DNA时,如果
存在酶切位点的变化,就会产生长度不同的DNA片段,电
泳后用克隆探针检测时,就会出现泳动行为的改变。
基本过程:取得DNA样本——酶切——电泳——转移
至硝酸纤维膜上——DNA探针杂交——放射自显影
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图7-1Southern杂交过程
图7-1Southern杂交过程
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图7-2RFLP检测
图7-2RFLP检测7
○聚合酶链式反应(polymerase
chainreaction,PCR)
PCR是1985年建立的一种体外快速扩增特定基因或
DNA序列的方法。
原理:在反应温度为90—95℃时,DNA变性成为单链;
反应温度降至45—65℃时,两种引物与两条单链DNA退火而
配对结合;反应温度升至72℃左右时,在TaqDNA聚合酶作
用下,引物以单链DNA为模板逐步延伸成新的单链。“变性
——退火——延伸”这一循环完成后,DNA复制了一次,由
一个DNA分子成为两个DNA分子。
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图7-3
图7-3
DNA
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