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大小鼠血清采集
一、仪器耗材
（一）共用
低温恒温离心机、-20℃冰箱、4℃冰箱、鼠笼、无害化冰箱、50ml离心管、500ml血清瓶、一次性橡胶手套、移液器（0.1~1ml、1~5ml）及配套吸头、废弃吸头存储盒、75%酒精。
（二）小鼠
1.5mlEP管、无盖离心管盒、弯头镊、眼科剪。
（三）大鼠
麻醉剂（3%戊巴比妥钠）、5ml无菌注射器、大鼠解剖台、手术剪、利器盒、止血钳、弯头镊、10ml无抗凝剂真空采血管（含一次性采血针）、止血纱布、电子天平（精度0.1~1g即可）。
二、操作方法
（一）小鼠血清的采集
1、摘除眼球采血
（1）使小鼠爬伸在笼盒上，左手拇、食指抓取小鼠双耳及颈后皮肤，小指固定尾部，用眼科剪减去小鼠待摘眼球脸部胡须；
（2）中指将小鼠左侧前肢轻压在胸骨心脏部位，无名指按在腹部，捻动拇指，轻压取血侧眼部皮肤，使眼球充血突出；
（3）用弯头镊夹取眼球；
（4）根据需要捻动拇指与食指的方向，使血液从眼眶内以不同速度垂直流入1.5mlEP管中；
（5）同时用左手中指轻按小鼠心脏部位，以加快心脏泵血速度；
（6）当血液流尽时，用脱臼法处死小鼠。
2、分离血清
（1）将EP管中的血室温静置2小时；
（2）再置于4℃冰箱内3~4小时或过夜；
（3）待血液凝固血块收缩后，4℃3500rpm离心10分钟；
（4）使用移液器吸取上清液置于干净的50ml离心管中4℃冰箱暂存，待所有动物血清收集完成后，再次离心转移到500nl血清瓶中，保存于-20℃冰箱。
3、注意事项
（1）采血场所有充足的光线，室温夏季保持在25~28℃，冬季保持在15~20℃为宜；
（2）防止血液浸入眼部周围毛发，否则会造成污染和溶血；
（3）按压心脏时，用力一定要适度，若用力过度，一是会造成动物采血中途死亡，使采血不完全，二是有可能引起溶血现象发生，影响血清质量；
（4）采血用的器材和试管必须保持清洁干燥；
（5）采血时要防止小鼠挣扎，否则会损失比较多的血液；
（6）若一边眼球摘除后眼部发生凝血，无法继续采血时，可将另一侧眼球摘除，用相同的方法继续采血；
（7）血液凝固后不宜在4℃放置过久，否则会溶血；
（8）移液器吸取上清液时注意不要将血凝块吸取出来。
（二）大鼠血清的采集
1、麻醉剂的配制
3%戊巴比妥钠：称取3g戊巴比妥钠定容到100ml生理盐水中，混匀，5ml无菌注射器吸取备用。
2、动物麻醉
（1）将待麻醉的大鼠称重，并根据体重计算需要使用的麻醉剂数量，大鼠按0.1~0.2ml/100g体重注射3%戊巴比妥钠；
（2）用一手抓住大鼠的尾根部提起置于较粗糙的台面或笼具盒上，一手抓住大鼠的尾巴向后拉，用另一手拇指、食指抓住头颈部皮肤，手掌握住大鼠上半身背部皮肤，即可将大鼠完全固定，进行下步操作；
（3）手持已抽好戊巴比妥钠溶液的注射器，食指固定注射器前端。针头在鼠的下腹部腹白线稍右/左位置，从下腹部朝头方向平行地刺入皮下；
（4）进针3~5mm后，再将针头与皮肤成45°角斜穿过腹肌，当感到有落空感时，停止进针，固定针头。回抽无回血、无肠液、尿液，便可缓缓推入药液；
（5）将注射麻醉剂后的大鼠置于另外的笼盒中，3~5分钟后待大鼠不动弹处于麻醉状态再进行下步操作。
3、剖剪采血
（1）将大鼠仰卧固定在解剖台上，背部可以放置一10ml废弃真空采血管以充分暴露腹主动脉；
（2）75%酒精腹部消毒后，左手用止血钳夹住皮肤，右手用手术剪沿腹正中线“V”字型剪开腹腔，暴露脏器，止血钳钳住后将皮肤后翻以固定皮肤；
（3）用止血纱布轻轻扒开腹腔内各脏器，用小镊子轻轻扒开血管周围脂肪（以清晰看清血管，不影响接下来进针时的视线为准）；
（4）在脊柱前可见两条较大的血管，靠右边颜色稍白的1条就是腹主动脉；
（5）用弯镊轻轻提起血管，右手持采血针，针尖斜面向下，入针角度约30°左右，在骨骼总动脉分支前方进针沿着腹主动脉向心端方向刺入，缓慢向前移动，深度5mm左右为宜，此时可见采血针头部管内有血液，如操作生疏针尖可插入深一些，防止刺破血管壁；
（6）将10ml真空采血管向内有针头的套筒里缓慢地用力，使采血针刺入真空采血管中，血液便会自动流出；
（7）当血液量达到所要求的刻度时就可以将采血管拔出，将采血针置于利器盒中。
4、分离血清
（1）将10ml采血管中的血室温静置2小时；
（2）再置于4℃冰箱内3~4小时或过夜；
（3）待血液凝固血块收缩后，4℃3500rpm离心10分钟；
（4）使用移液器吸取上清液置于干净的50ml离心管中4℃冰箱暂存，待所有动物血清收集完成后，再次离心转移到500nl血清瓶中，保存于-20℃冰箱。
5、注意事项
（1）若注射麻醉剂后的大鼠超过10分钟未进入麻醉状态，则需再次麻醉；
（2）扒开血管
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