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实验十:酶的特性
▪实验目的:加深对酶的性质的认识。
▪实验内容:
1.温度对酶的影响
2.pH对酶的影响
3.酶的激活及抑制剂
4.酶的专一性
温度对酶的影响
▪一、原理:
酶的催化作用受温度的影响,在最适温度下,酶
的反应速度最高。大多数动物酶的最适温度为37-
40℃,植物酶的最适温度为50-60℃。
酶对温度的稳定性与其存在形式有关。有些酶的
干燥制剂,虽加热到100℃,其活性并无明显改变,
但在100℃的溶液中却很快地完全失去活性。
低温能降低或抑制酶的活性,但不能使酶失活。
▪二、器材:
1)试管及试管架
2)恒温水浴
3)冰浴
4)沸水浴
▪三、试剂和材料:
5)含0.2﹪淀粉的0.3%NaCl溶液150ml,需新鲜
配制
6)稀释200倍的唾液50ml:用蒸馏水漱口,以清
除事物残渣,再含一口蒸馏水,半分钟后使
其流入量筒并稀释200倍,混匀备用。
7)KI-碘溶液50ml:将KI20g及碘10g溶于100ml
水中。使用前稀释10倍。
▪四、操作方法:
淀粉和可溶性淀粉遇碘呈蓝色。糊精按其分子的大小,遇
碘可呈蓝色、紫色、暗褐色或红色。最简单的糊精遇碘不
呈颜色,麦芽糖遇碘也不呈色。在不同温度下,淀粉被
唾液淀粉酶水解的程度,可由水解混合物遇碘呈现的颜色
来判断。
取三支试管,编号后按下表加入试剂:
管号123
淀粉溶液(ml)1.51.51.5
稀释唾液(ml)11-
煮沸过的稀释---
唾液(ml)
▪摇匀后,将1号、3号两试管放入37℃恒
温水浴中,2号试管放入冰中,10min后去
处,(将2号管内液体分为两半)用KI-碘
溶液来检验1、2、3管内淀粉被唾液淀粉酶
水解的程度。记录并解释结果,将2号管剩
下的一半溶液放入37℃水浴中继续保温
10min后,再用碘液实验,结果如何?
pH对酶活性的影响
▪一、原理
酶的受环境pH的影响极为显著。不同酶的最适pH值不同。本实验观
察pH对唾液淀粉酶活性的影响,唾液淀粉酶的最适pH约为6.8。
▪二、器材
1)试管及试管架
2)吸管
3)滴管
4)50ml锥形瓶
5)恒温水浴
▪三、试剂和材料
1)新配制的溶于0.3%NaCl的0.5%淀粉溶液250ml
2)稀释200倍的新鲜唾液100ml
3)0.2mol/L磷酸氢二钠溶液600ml
4)0.1mol/L柠檬酸溶液400ml
5)KI-碘溶液50ml
6)pH试纸:pH=5、pH=5.8、pH=6.8、pH=8四种
▪四、操作方法:
取四个标有号码的50ml锥形瓶。用吸管按下表添
加0.2mol/L磷酸氢二钠溶液和0.1柠檬酸溶液以
pH5.0-8.0的四种缓冲液。
从四个锥形瓶中各取缓冲液3ml,分别注入4支带
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