一大二资源生化试验酶特性.pdf

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实验十:酶的特性

▪实验目的:加深对酶的性质的认识。

▪实验内容:

1.温度对酶的影响

2.pH对酶的影响

3.酶的激活及抑制剂

4.酶的专一性

温度对酶的影响

▪一、原理:

酶的催化作用受温度的影响,在最适温度下,酶

的反应速度最高。大多数动物酶的最适温度为37-

40℃,植物酶的最适温度为50-60℃。

酶对温度的稳定性与其存在形式有关。有些酶的

干燥制剂,虽加热到100℃,其活性并无明显改变,

但在100℃的溶液中却很快地完全失去活性。

低温能降低或抑制酶的活性,但不能使酶失活。

▪二、器材:

1)试管及试管架

2)恒温水浴

3)冰浴

4)沸水浴

▪三、试剂和材料:

5)含0.2﹪淀粉的0.3%NaCl溶液150ml,需新鲜

配制

6)稀释200倍的唾液50ml:用蒸馏水漱口,以清

除事物残渣,再含一口蒸馏水,半分钟后使

其流入量筒并稀释200倍,混匀备用。

7)KI-碘溶液50ml:将KI20g及碘10g溶于100ml

水中。使用前稀释10倍。

▪四、操作方法:

淀粉和可溶性淀粉遇碘呈蓝色。糊精按其分子的大小,遇

碘可呈蓝色、紫色、暗褐色或红色。最简单的糊精遇碘不

呈颜色,麦芽糖遇碘也不呈色。在不同温度下,淀粉被

唾液淀粉酶水解的程度,可由水解混合物遇碘呈现的颜色

来判断。

取三支试管,编号后按下表加入试剂:

管号123

淀粉溶液(ml)1.51.51.5

稀释唾液(ml)11-

煮沸过的稀释---

唾液(ml)

▪摇匀后,将1号、3号两试管放入37℃恒

温水浴中,2号试管放入冰中,10min后去

处,(将2号管内液体分为两半)用KI-碘

溶液来检验1、2、3管内淀粉被唾液淀粉酶

水解的程度。记录并解释结果,将2号管剩

下的一半溶液放入37℃水浴中继续保温

10min后,再用碘液实验,结果如何?

pH对酶活性的影响

▪一、原理

酶的受环境pH的影响极为显著。不同酶的最适pH值不同。本实验观

察pH对唾液淀粉酶活性的影响,唾液淀粉酶的最适pH约为6.8。

▪二、器材

1)试管及试管架

2)吸管

3)滴管

4)50ml锥形瓶

5)恒温水浴

▪三、试剂和材料

1)新配制的溶于0.3%NaCl的0.5%淀粉溶液250ml

2)稀释200倍的新鲜唾液100ml

3)0.2mol/L磷酸氢二钠溶液600ml

4)0.1mol/L柠檬酸溶液400ml

5)KI-碘溶液50ml

6)pH试纸:pH=5、pH=5.8、pH=6.8、pH=8四种

▪四、操作方法:

取四个标有号码的50ml锥形瓶。用吸管按下表添

加0.2mol/L磷酸氢二钠溶液和0.1柠檬酸溶液以

pH5.0-8.0的四种缓冲液。

从四个锥形瓶中各取缓冲液3ml,分别注入4支带

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