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大题15现代生物科技专题(二)
1.新冠病毒COVID﹣19至今仍在全球流行,疫苗是终结病毒肆虐的有利武器。各国科研人员都在
想方设法进行疫苗的研制,在科研攻关应急项目中并行安排了多条技术路线(如图)。
回答下列问题。
(1)途径Ⅰ和Ⅱ都需要通过动物细胞培养获得足够数量的病毒株。在动物细胞培养中,通
过,以保证培养液无菌、无毒。此外还要定期用酶处理细胞,使的细胞脱落形成
细胞悬液。途径Ⅰ与途径Ⅱ相比,生产的疫苗安全性更高的是途径。
(2)途径Ⅲ中,用到的酶至少有等4种,为检测步骤⑦所表达的蛋白与病毒抗原蛋白是
否有相同的免疫反应特性,可用工程菌表达的蛋白与进行杂交实验。
(3)途径Ⅳ生产的DNA疫苗直接注入人体后,在人体细胞中表达出的会引起机体产生
免疫应答。与DNA疫苗相比,mRNA疫苗的安全性更有优势,这是因为,无整合到宿主
细胞染色体基因组中的风险,且易被水解,不会遗传给子细胞。
【分析】1、基因工程技术的基本步骤:
(1)目的基因的获取的方法有:从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
(2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、终
止子、标记基因和复制原点等。
(3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样。将目的基因导入植
物细胞的方法有:农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的
方法是:显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是:感受态细胞法。
(4)目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目
的基因﹣﹣DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA﹣﹣分子杂交技术;③检
测目的基因是否翻译成蛋白质﹣﹣抗原﹣抗体杂交技术.个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、
活性鉴定等。
2、动物细胞培养的条件:
(1)无菌、无毒的环境:①消毒、灭菌;②添加一定量的抗生素;③定期更换培养液,以清除
代谢废物。
(2)营养物质:糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等,还需加入血清、血浆等天然
物质。
(3)温度和pH:36.5℃±0.5℃;适宜的pH:7.2~7.4。
(4)气体环境:95%空气(细胞代谢必需的)和5%的CO2(维持培养液的pH)。
【解答】解:(1)在动物细胞培养中,通过添加抗生素,及时更换培养液等措施,以保证培养
液无菌、无毒。此外还要定期用胰蛋白酶(胶原蛋白酶)处理细胞,使贴壁生长的细胞脱落形成
细胞悬液。生产疫苗的途径Ⅰ、Ⅱ中,途径Ⅱ中通过裂解病毒提取抗原蛋白,安全性更高。
(2)途径Ⅲ中,过程①需要逆转录酶,①过程得到目的基因后可通过PCR技术扩增目的基因,
需要Taq酶,过程②需要限制酶,过程③需要DNA连接酶。通过抗原﹣抗体杂交实验,可检测
步骤⑦所表达的蛋白与病毒抗原蛋白是否有相同的免疫反应特性,即用工程菌表达的蛋白与(康
复病人血清中的)特异性抗体杂交实验。
(3)途径Ⅳ生产的DNA疫苗直接注入人体后,在人体细胞中表达出的抗原蛋白会引起机体产生
免疫应答。因为mRNA不需要进入细胞核,无整合到宿主细胞染色体基因组中的风险,且易被
RNA(水解)酶水解,不会遗传给子细胞,因此与DNA疫苗相比,mRNA疫苗的安全性更有优
势。
故答案为:
(1)添加抗生素,及时更换培养液贴壁生长Ⅱ
(2)逆转录酶、限制酶、DNA连接酶、Taq酶(康复病人血清中的)特异性抗体
(3)抗原蛋白mRNA不需要进入细胞核RNA(水解)酶
2.某研究人员设计了下列技术路线,以期获得甘蓝和萝卜体细胞杂交植株。
请回答下列问题:
(1)制备
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