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·606·中华病理学杂志2023年6月第52卷第6期ChinJPathol,June2023,Vol.52,No.6
·论著·
RNAm6A去甲基化酶ALKBH5基因敲除
对老年小鼠小脑形态和功能的影响
111211
费祎马春卉李晴宋伟佟伟民牛亚梅
1中国医学科学院基础医学研究所暨北京协和医学院基础学院病理学系,北京100005;
2中国医学科学院基础医学研究所暨北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家
重点实验室生物化学与分子生物学系,北京100005
通信作者:牛亚梅,Email:niuym@ibms.pumc.edu.cn
【摘要】目的观察RNAm6A去甲基化酶ALKBH5基因敲除之后对老年小鼠小脑形态和功能
的影响,探究ALKBH5在小脑退行性病变中的作用。方法免疫印迹实验检测不同年龄C57BL/6野
生型小鼠(包括2月龄、6月龄、12月龄、18月龄)小脑中ALKBH5的蛋白水平。通过免疫组织化学实
验检测中年(12月龄)及老年(18月龄)野生型小鼠和ALKBH5基因敲除(ALKBH5-/-)小鼠中NeuN、
Calbindin‑D28K、MAP2、胶质纤维酸性蛋白等蛋白的表达情况。平衡木实验和步态实验检测小鼠平
衡能力以及运动协调能力。结果ALKBH5蛋白在小脑中的表达水平随着小鼠生理性衰老的进行而
逐渐升高。在中年小鼠中,野生型和ALKBH5-/-小鼠的体重、脑重以及小脑的形态大小没有明显差
别,同时颗粒神经元、浦肯野细胞及神经元树突的形态和数量均未见明显改变。在老年小鼠中,相较
于野生型小鼠,ALKBH5-/-小鼠的体重、全脑重和小脑重分别下降15%、10%和21%(P0.05)。
ALKBH5在浦肯野细胞中的表达高于其他类型的神经细胞,与之对应在老年ALKBH5-/-小鼠中浦肯野
神经元的数量下降40%,树突的长度和密度也明显减少(P0.01)。老年ALKBH5-/-小鼠通过平衡木相
较于同龄的野生型小鼠所用的时间增加70%,且出现步态不稳的情况(P0.01)。结论RNAm6A去
甲基化酶ALKBH5缺失会造成老年小鼠小脑萎缩、浦肯野神经元缺失与受损,进而损害其运动协调和
平衡能力。上述结果提示RNAm6A甲基化失衡会导致小脑的神经退行性病变。
【关键词】小脑;浦肯野细胞;RNAm6A甲基化;ALKBH5
基金项目:中国医学科学院医学与健康科技创新工程(2021‑I2M‑1‑020)
EffectsofRNAM6AdemethylaseALKBH5genedeficiencyonmorphologyandfunctionof
cerebelluminagedmice
111211
FeiYi,MaChunhui,LiQing,SongWei,TongWeimin,NiuYamei
1DepartmentofPathology,InstituteofBasicMedicalSciencesChineseAcademyofMedicalScience,
SchoolofBasicMedicinePekingUnionMedicalCollege,Beijing100005,China;2Departmentof
BiochemistryandMolecularBiology,StateKeyLaboratoryofMedicalMolecularBiology,Instituteof
BasicMedicalSciencesChineseAcademy
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