HT22细胞糖氧剥夺／复氧模型建立条件的优化研究.pdf

中华神经医学杂志2016年1月第15卷第1期ChinJNeuromed,January2016,Vol.15,No.1窑55窑

窑基础研究窑

HT22细胞糖氧剥夺/复氧模型

建立条件的优化研究

赵立希王文竹张通陈惠刘丽旭

100068北京中国康复科学所神经损伤与康复北京市重点实验室(赵立希尧王文竹尧

陈惠)曰100068北京首都医科大学康复医学院中国康复研究中心北京博爱医院神

经康复科(张通尧刘丽旭)

通信作者院刘丽旭Email院

liulixu_crrc@163.com

DOI:10.3760/cma.j.issn.1671-8925.2016.01.011

揖摘要铱目的优化小鼠海马神经元HT22细胞糖氧剥夺/复氧模型的建立条件探讨该模型

建立的依据并测定相关指标遥方法首先通过细胞计数法绘制HT22细胞的生长曲线并计算该

细胞的倍增时间遥其次采用乳酸氢酶(LDH)细胞活性实验确认模型最佳的糖氧剥夺时长和复氧

时长遥最后用CCK-8细胞活性实验尧细胞计数法尧细胞形态学观察以及流式细胞仪凋亡检测方法

进一步确定模型建立的条件遥结果HT22细胞的倍增时间为17h18min遥最佳模型的糖氧剥夺

时长为18h复氧时间长为20h遥CCK-8检测结显示糖氧剥夺18h/复氧20h(OGD18h/R20h)

细胞吸光度值为0.334依0.138对照组细胞吸光度值为0.756依0.026差异有统计学意义(P0.05)遥在

形态学方面OGD18h/R20h细胞明显发生皱缩遥流式细胞仪凋亡检测结显示OGD18h/R20h

细胞凋亡晚期和坏死细胞分布比例为24.56%依5.76%早期凋亡细胞2.63%依0.55%对照组细胞

凋亡晚期和坏死细胞分布比例为8.13%依0.87%早期凋亡细胞0.80%依0.10%差异均有统计

学意义(P0.05)遥结论HT22细胞糖氧剥夺/复氧模型的糖氧剥夺时长和复氧时长与细胞的倍

增时间有关糖氧剥夺18h后复氧20h可较好实现建模要求遥

揖关键词铱糖氧剥夺/复氧模型曰倍增时间曰细胞死亡曰细胞形态

(1)基金项目院国家自然科学基金

(2)基金项目院央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金(2014CZ-12)

(3)基金项目院神经损伤与康复北京市重点实验室2015年度科技创新基地培育与发展专项项目

(Z151100001615055)

中图分类号铱Q25文献标志码铱A文章编号铱1671-8925(2016)01-0055-05

Optimizationofconditioninoxygen-glucosedeprivation/re-oxygenationmodelsofHT22cells

ZhaoLixi,WangWenzhu,ZhangTong,ChenHui,LiuLixu

BeijingKeyLaboratoryofNeuralInjuryandRehabilitation,InstituteofRehabilitationScienceof

China,Beijing100068,China(ZhaoLX,WangWZ,ChenH);BeijingBoaiHospital,China

RehabilitationResearchCenter,SchoolofRehabilitationMedicine,CapitalMedicalUniversity,Beijing

100068,Chin