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免疫学检验
IgG为单体分子，是血清和细胞外液中含量最高的
血清中的IgM为五聚体，是血清中分子量最大的
血清IgM水平升高提示有近期感染，有助于感染性疾病的早期诊断。
IgE介导:一型超敏反应
抗原与抗体能够特异性结合是基于抗原表位与抗体超变区分子间的结构互补性与亲和性
抗原与抗体结合完全依靠非共价键的相互作用。
抗原抗体的结合力有：库伦引力、范登华引力、氢键结合力、疏水作用力（这种疏水结合对于抗原抗体的结合很是重要，提供的作用力最大）
亲和力：是指抗体分子上一个抗原结合位点与对应的抗原表位之间相适应而存在着的引力，它是抗原抗体间固有结合力。
亲和力可用亲和常数KA来表示：KA=K1/K2=[Ab-Ag]/[Ab]*[Ag]
KA值越大，[Ab-Ag]浓度越大亲和力越高，抗体与抗原结合越牢固，反之抗原抗体复合物就容易解离。
抗原抗体的结合使电荷减少或消失，电子云也消失，蛋白质有亲水胶体转化为疏水胶体。此时，如再加入电解质，如NaCl，则进一步使疏水胶体相互靠拢，形成可见的抗原抗体复合物
抗原抗体反应的特点：（1）特异性（2）抗原抗体的比例（3）可逆性
在等价带前后分别为抗体过剩或抗原过量，形成的沉淀物少或无，这种现象在免疫测定中称为带现象。
意义：只有当抗原抗体比例合适时，才易出现可见反应。在免疫学方法测定抗原时，应使反应系统中有足够的抗体量，否则测得的量会小于实际含量，甚至出现假阴性结果。
抗体过量时称为前带，抗原过剩时称为后带，抗原抗体比例合适称为等价带
在环境因素中，凡是减弱或消除抗原抗体亲和力的因素都会使复合物解离增加。如PH改变，过高或过低的PH均可破坏离子间的静电引力，使抗原抗体的结合力下降。对亲和力本身较弱的反应体系而言，仅增加离子强度即可达到解离抗原抗体复合物的目的。改变ph和离子强度是最常用的促解离方法，免疫技术中的亲和层析就是以此为依据纯化抗原或抗体。
抗原抗体反应的环境因素：电解质、酸碱度、温度、抗原抗体比例。详见书p23
差速离心常用于分离细胞器和病毒，分离效果为粗分离，纯度和效率不高。
盐析法为从血液中粗提免疫球蛋白常用的方法
*常用的中性盐有硫酸铵。
凝胶层析：是以各种多孔凝胶为固定相，利用物质的相对分子量不同而达到分离的一种层析技术
常用凝胶：葡聚糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶、琼脂糖凝胶
纯化抗血清先用盐析法后用亲和层析法
*亲和层析法原理：利用分子间亲和力的特异性和可逆性。亲和层析一次纯化即可得到很纯的物质。
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS）。可利用蛋白质分子量差异将各种蛋白质分开
免疫时间：第一次免疫和第二次免疫的间隔时间为10-20天，第二次为7-10天
腹腔或静脉免疫一般常用于加强免疫或颗粒性抗原的免疫如：淋巴结内微量注射法，抗原只需10-100ug即可获得免疫效果
免疫佐剂：同抗原一起预先注射到机体内，能增强机体对抗原的免疫应答或改变免疫应答类型的非特异性免疫增强性物质，称为免疫佐剂，简称佐剂。应用佐剂的目的是为了提高抗原的免疫原性，从而增强体液免疫和细胞免疫的水平，获得高效价抗体。
–弗氏佐剂可分为弗氏完全佐剂(CFA)石蜡油+羊毛脂+卡介苗和弗氏不完全佐剂（IFA石蜡油+羊毛脂
HAT培养基的组成：是由常用的细胞培养基加入次黄嘌呤（H）氨基碟呤（A）和胸腺嘧聢核苷（T）组成。A为叶酸拮抗物，用以阻断细胞合成DNA的主要途径，H和T提供核苷酸合成的前提，使细胞能通过替代途径合成DNA.
HAT培养基的选择作用：细胞DNA合成有两条途径，主要途径是由糖和氨基酸合成核苷酸，进而合成DNA。叶酸为重要的辅酶参与这一合成过程。另一辅助途径是在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情况下，经次黄嘌呤磷酸核糖转化酶（HGPRT）和胸腺嘧啶核苷激酶的催化作用合成DNA。
有限稀释法：最终使每个培养空内平均含有一个细胞。实际上是0.1.2
目前最有效的单克隆抗体纯化方法为亲和纯化法（亲和层析法）
常用的凝胶有：琼脂、琼脂糖、聚丙烯酰胺等
Mancini曲线适用于大分子抗原和长时间扩散（48h）的结果处理。Fahey曲线，适用于小分子抗原和较短时间扩散(24h)的结果处理。
对流免疫电泳的原理：是将双向免疫扩散与电泳相结合，原理：在PH8.6的琼脂凝胶中，抗原蛋白等电点（4~5）较低，带较多的负电荷，且分子较小，向正极的泳动速度大于向负极的电渗，抗原泳向正极；抗体蛋白等电点较高，带较少的负电荷，，且分子较大，向正极电费泳动速度小于向负极的电渗，抗体泳向负极。电泳时抗体放正极侧，抗原放负极侧，抗原抗体在电场中相对泳动，彼此相遇而发生特异性结合，在比例合适处形成白色沉淀线。
免疫电泳是将蛋白质区带电泳和双向免疫扩散相结合的免疫学分析。
用途：a.纯化抗原或抗体的成分分析，粗略检测其纯度。b.正常和异常体液中蛋白质
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