培养基对微生物的选择作用上课用.pptx

培养基对微生物的选择作用上课用啤酒、果酒、食醋等谷氨酸钠就是味精得主要成分疫苗百白破卡介苗青霉素头孢霉素红霉素四环素如何检测饮用水、牛奶中得细菌数微生物技术微生物:就是一切肉眼看不见或看不清楚得微小生物得总称。分类病毒细菌放线菌真菌原生动物病毒界原核生物界微生物真菌界原生生物界一、培养基得制备培养基(培养液)就是由人工配制而成得适合微生物生长繁殖或积累代谢产物得营养基质。作用:用以培养、分离、鉴定和保存各种微生物怎么制备培养基？培养基得制备就是研究和利用微生物得最基本技术之一培养基得制备包括培养基得配制灭菌关键:准确称量、调准PH、规范制作棉塞、彻底灭菌1、培养基得营养成分一般(基本)成分:碳源、氮源、水、微量元素、无机盐特殊成分:生长因子(包括维生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等,牛肉膏、酵母膏、蛋白胨中含有)细菌:pH7、0~8、0放线菌:pH7、5~8、5酵母菌:pH3、8~6、0霉菌:pH4、0~5、8藻类:pH6、0~7、0原生动物:pH6、0~8、02、pH、渗透压得需求:初始pH大家应该也有点累了，稍作休息大家有疑问的，可以询问和交流3、种类:(1)按物理状态分:固体培养基和液体培养基、半固体培养基。(2)按功能分:选择培养基和鉴别培养基。(3)按成分分:天然培养基和合成培养基。不同得微生物往往需要采用不同得培养基配方不管哪种培养基,一般都含有水、碳源、氮源、无机盐、生长因子(特殊营养物质)等营养物质,另外还需要满足微生物生长对pH、以及渗透压等要求。二、灭菌1、无菌技术得概念无菌操作泛指在培养微生物得操作中,所有防止杂菌污染得方法。成功地培养微生物得关键。为什么要灭菌？配制培养得各种营养物质和容器等中含有不同得生物,所以配置好后必须立即灭菌,及时杀死培养基中得微生物,同时防止微生物大量繁殖造成得培养基营养成分得改变2、消毒与灭菌得概念及两者得区别(1)消毒定义:用较温和得物理或化学得方法杀死物体表面或内部得部分微生物(不包括芽孢)(2)灭菌得定义:用较强烈得理化因素杀死物体内外得所有微生物,包括芽孢灭菌得方法:高温灭菌1、灼烧灭菌(2)干热灭菌:160-170℃下加热1-2h。(3)高压蒸气灭菌0、11MPa、121℃下维持20-30min、思考1、无菌技术除了用来防止实验室得培养物被其她外来微生物污染外,还有什么目得？思考1、无菌技术除了用来防止实验室得培养物被其她外来微生物污染外,还有什么目得？答:无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。2、请您判断以下材料或用具就是否需要消毒或灭菌。如果需要,请选择合适得方法。(1)培养细菌用得培养基与培养皿(2)玻璃棒、试管、烧瓶和吸管(3)实验操作者得双手2、请您判断以下材料或用具就是否需要消毒或灭菌。如果需要,请选择合适得方法。(1)培养细菌用得培养基与培养皿(2)玻棒、试管、烧瓶和吸管(3)实验操作者得双手答:(1)、(2)需要灭菌;(3)需要消毒。(三)实验操作(1)制备牛肉膏蛋白胨培养基(用以培养细菌)(三)实验操作(一)制备牛肉膏蛋白胨培养基(用以培养细菌)牛肉膏蛋白胨固体培养基配方牛肉膏3、0g蛋白胨10、0gNaCl5、0g琼脂20、0g将上述物质溶解后,添加水,定容至1000mL操作步骤1、计算、称量2、溶化3、调pH:pH7、4~pH7、64、分装:分装过程中注意不要使培养基沾在管口或瓶口上,以免沾污棉塞而引起污染。分装三角烧瓶得量均为其容积得1/5(不超过三角烧瓶容积得一半为宜。)5、加塞6、包扎7、灭菌:将培养基转移至三角锥瓶中或试管内,塞上棉花塞,包上牛皮纸,再放入高压蒸气灭菌锅,在压力为0、11MPa、温度为121℃、8、倒平板:待培养基冷却到50℃-60℃左右时,在酒精灯附近倒平板或制成斜面。(操作见课本第6页)2d后观察平板,无杂菌污染才可用来接种。倒平板技术①将灭过菌得培养皿放在火焰旁得桌面上,右手拿装有培养基得锥形瓶,左手拨出棉塞。1234倒平板技术②右手拿锥形瓶,使瓶口迅速通过火焰。1234③用左手拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖。倒平板技术1234倒平板技术④等待平板冷却凝固,大约需5~10min。然后,将平板倒过来放置,使皿盖在下,皿底在上。12349、无菌检查:将灭菌得培养基放入37℃得温室中培养24—48小时,以检查灭菌就是否彻底。问题讨论1、培养基灭菌后,需要冷却到50℃左右时,才能用来倒平板。您用什么办法来估计培养基得温度？问题讨论1、培养基灭菌后,需要