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BCA法测定蛋白浓度主讲人:周芳亮【原理】:碱性条件下,蛋白将Cu2+还原为Cu+,Cu+与BCA试剂形成紫颜色的络合物,测定其在562nm处的吸收值,并与标准曲线对比,即可计算待测蛋白的浓度。
【主要特点】1.不受样品中离子型和非离子型去污剂影响。2.检测不同蛋白质分子的变异系数远小于考马氏亮蓝。3.快速:45分钟内完成测定。4.准确灵敏,线性范围广。5.经济实用:在微孔板中进行测定,可大大节约样品和试剂用量。??【实验器材与试剂】1.器材:分光光度计、恒温水浴锅。2.试剂:BCA试剂盒;待测样品。【操作步骤】1.配制BCA工作液:根据标准品和样品数量,按50体积BCA试剂加1体积Cu试剂(50:1)配制适量BCA工作液,充分混匀。2.稀释标准品:用生理盐水稀释蛋白标准品BSA。实验步骤实验步骤200蛋白液稀释
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