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ICS07.080
A21
中华人民共和国国家标准
—
GB/TXXXXX201X
生物活性肽抗氧化性测定方法DPPH和
ABTS法
Testmethodofantioxidantactivityforbioactivepeptide—DPPHandABTS
method
(征求意见稿)
201X-XX-XX发布201X-XX-XX实施
国家市场监督管理总局发布
中国国家标准化管理委员会
1
GB/T××××—201×
生物活性肽抗氧化性测定方法DPPH和ABTS法
1范围
本标准规定了DPPH和ABTS法测定生物活性肽抗氧化性能的方法。
本标准适用于生物活性肽抗氧化性能测定。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本文件。
凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1
生物活性肽bioactivepeptide
对生物体的生命活动具有特定调控作用的肽类化合物。
第一法清除DPPH•自由基法
4原理
1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)是一种暗紫色棱柱状结晶,在无水乙醇溶液中呈深紫色,DPPH•
自由基在可见光区517nm处出现强吸收峰。该法原理是通过DPPH提供的1个稳定的DPPH•自由基与抗氧化
性肽提供的1个电子配对结合,使DPPH的特征性紫色消失,变为无色或浅黄色,通过紫外可见分光光度计
测定反应后的吸光度,根据吸光度值评价抗氧化肽的抗氧化能力。
5试剂或材料
除非另有规定,仅使用分析纯试剂。
5.1水:GB/T6682一级。
5.250μg/mLDPPH溶液
精确称取DPPH0.0050g,无水乙醇定容至100mL,超声波清洗机300Hz~1000Hz避光超声25min,
使其充分溶解后作为DPPH测定溶液。该溶液应现用现配。
5.310.0mg/mL谷胱甘肽溶液
精确称取还原型谷胱甘肽(CHNOS,CAS:70-18-8)0.0100g,蒸馏水定容至1.0mL,充分混合
101736
均匀,配成母液。
6仪器设备
6.1分光光度计,波长范围为400nm~800nm,吸光度值精确至0.01。
6.2电子天平,感量值为0.0001g。
7操作步骤
7.1样品制备
精确称取生物活性肽样品0.0100g,蒸馏水定容至1.0mL,充分混合均匀,配成10.0mg/mL的母液。
用蒸馏水将母液稀释至不同倍数,得到不同浓度的待测溶液。
注:水溶性好的样品,直接用蒸馏水溶解与定容;水溶性差的样品,先溶于二甲基亚砜(DMSO),再用蒸馏水定容。
2
GB/T××××—201×
7.2测定
取3支试管,分别编号为1、2、3号,每支试管中按照表1的组合添加试剂。
在1号试管中加入
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