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第二章细胞生物学的研究方法

;;;表一、几种介质的折射率;(二)荧光显微镜:;荧光显微镜的应用

定性、定位和定量的研究组织内的荧光标记物质。

对活细胞内分子的动态变化进行实时观察。;;(四)暗视野显微镜通过散射光成像;(五)显微电影摄影技术记录细胞或细胞器的运动过程

原理:用显微电影摄影术或电视录像以一定时间间隔拍摄。

应用:准确记录细胞或细胞器的运动过程和速度。;(六)共聚焦激光扫描显微境

Laserconfocalscanningmicroscope,LCSM;普通荧光显微镜(a)与激光共聚焦显微镜(b)的成像比较;;二、电子显微技术;;透射电镜及其图像;(二)扫描电子显微镜SEM;扫描电镜及其图像;;;;疟疾破坏的两个红细胞;;显微镜;;细胞分离方法;(一)离心方法

利用细胞的密度特性可有效分离不同的细胞。

如血浆白细胞和红细胞的分离。

;;;;二、细胞培养;;2.细胞培养的主要方式是原代培养和传代培养

原代培养(primaryculture):直接从体内获取的组织和细胞进行的首次培养。

传代培养(secondaryculture):原代培养的细

胞经过增殖达到一定密度后,将细胞分散,从一个培养器以一定比例移到另一个或几个容器中的扩大培养。;3.来源于体内的细胞可在体外建系(细胞系)

细胞系(cellline):在培养的细胞中产生“不死”的

变异细胞,这种细胞可以无限繁殖、传代。

细胞系的来源

取材于肿瘤组织的原代培养细胞(Hela细胞系)

培养过程中发生转化的正常细胞;;单克隆抗体技术

正常淋巴细胞(如小鼠脾细胞)具有分泌抗体的能力,但不能长期培养,瘤细胞(如骨髓瘤)可以在体外长期培养,但不分泌抗体。于是英国人Kohler和Milstein1975将两种细胞杂交而创立了单克隆抗体技术,获1984年诺贝尔奖。;第三节细胞组分的分离;一、细胞裂解;;匀浆;;本章重点

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