细胞学第6章B课件.pptVIP

RNA剪接的三种途径?◆核剪接(nuclearsplicing)●即从pre-mRNA中切除内含子●剪接发生在细胞核中●加工成熟的mRNA被运送到细胞质。mRNA合成、加工与运输真核生物mRNA的输出*确定内部启动子的实验?原核生物rRNA基因◆原核与真核生物的rRNA基因在组织结构上的差异:●重复频率：如E.coli，只重复了7次；●细菌的16SrRNA、23SrRNA、5SrRNA基因组成一个转录单位，在染色体上的排列顺序是∶16S-23S-5S。原核生物rRNA前体的加工6.2.2核糖体的装配?原核生物核糖体的装配◆小亚基的rRNA和蛋白质的装配关系:组成核糖体的蛋白质和rRNA在大小亚基中均有一定的空间排布。核糖体RNA的位置关系核糖体在组装过程中,某些蛋白质必须首先结合到rRNA上,其他蛋白才能组长上去即表现出先后层次。根据同rRNA结合的顺序,将核糖体蛋白分为两种:?真核生物核糖体装配模型◆80S前体颗粒形成●45SrRNA+5SrRNA+蛋白质●45SrRNA?41SrRNA◆大小亚基前体形成:●大:32SrRNA和5SrRNA●小:20S的前体rRNA；◆小亚基成熟与运送:20SrRNA?18SrRNA◆大亚基成熟与运送32SrRNA?28SrRNA+5.8SrRNA?核糖体的合成与装配6.3核糖体的功能◆核糖体的RNA结合位点◆与mRNA结合的位点:SD序列◆蛋白质合成中各位点的协同性◆多聚核糖体(polysome)◆蛋白质合成的抑制剂◆蛋白质合成的基本过程◆蛋白质寿命?核糖体的功能位点?真核与原核mRNA的差异SD(Shine-Delgarno)sequence蛋白质合成中各位点的协同性多聚核糖体?嘌呤霉素对蛋白质合成的抑制作用嘌呤霉素对蛋白质合成的抑制作用6.4Ribozymeand

AntisenseRNA◆核酶(ribozyme)◆反义RNA(AntisenseRNA)6.4.1真核细胞中的

小分子RNA(smallRNA)◆大小:100～300bases◆由RNA聚合酶Ⅱ或RNA聚合酶Ⅲ所合成◆某些像mRNA一样可被加帽◆类别:scRNAsnRNA?scRNA(smallcytoplasmicRNA):?snRNA(smallnuclearRNA)：◆snRNPs(smallnuclearribonucleoproteins)颗粒；●一个snRNA,～10个蛋白质;●有些蛋白质是某一snRNP所特有，有些则是各种snRNP所共有；◆snRNPs分类:由于snRNA富含脲嘧啶核苷，分类时把它分为U1、U2、……等。6.4.2AntisenseRNA?反义RNA分类◆I类∶直接作用于其靶mRNA的SD序列和/或编码区;◆Ⅱ类:与mRNA的SD序列的上游非编码区结合,从而抑制靶mRNA的翻译；◆III类:核酶(ribozyme)6.4.3Ribozyme◆AnenzymeinwhichRNAratherthanproteinisresponsibleforcatalyticactivity.◆与蛋白质酶相比，核酶的催化效率较低，是一种较为原始的催化酶。核酶的作用?核酶的发现◆几个基本概念●间隔序列(spacesequence)●内含子(intron)●外显子(exon)卵清蛋白前体mRNA的加工◆发现●1980s●ThomasCech等●研究四膜虫的26SrRNA前体加工●发现:26SrRNA前体可进行自剪切(self-splicing)◆证明●26SrRNA基因克隆●无细胞系统中转录●研究26SrRNA的前体分子剪切rRNA前体的自剪接?50S核糖体中23SrRNA核酶活性◆起因:肽酰转移酶(peptidyltransferase)◆发现者:HarryNoller等,1992年◆实验过程:●破坏50S亚基核糖体蛋白质蛋白酶K、SDS、苯酚等●破坏rRNA核酸酶处理50S亚基核糖体●抑制蛋白质合成用抑制剂处理◆结论:具有肽酰转移酶的活性分子是23SrRNA。6.4.3核酶?核酶的类型◆RNA和蛋白质复合物核糖核酸酶P(ribonucleaseP),是一种核糖核蛋白,含有一个tRNA分子(长为375个核苷)