2.3 蛋白质的理化性质.ppt

*动物生物化学蛋白质的理化性质蛋白质的两性解离与等电点动物生物化学蛋白质与氨基酸类似，也是两性电解质。蛋白质分子除两端的氨基和羧基可解离外，氨基酸残基侧链中某些基团，在一定的溶液pH条件下都可解离成带负电荷或正电荷的基团。一、蛋白质的两性解离蛋白质是多价的两性电解质蛋白质的两性解离与等电点蛋白质的两性解离与等电点动物生物化学二、蛋白质的等电点1.等电点定义：蛋白质的等电点(pI)当蛋白质溶液处于某一pH时，蛋白质解离成正、负离子的趋势相等，即成为兼性离子，净电荷为零，此时溶液的pH称为蛋白质的等电点。蛋白质的两性解离与等电点动物生物化学二、蛋白质的等电点2.等电点意义：蛋白质等电点的理论，对于制药实践具有指导和启发作用。蛋白质在等电点时溶解度最小，易于从溶液中沉淀析出，利用此特点，可进行蛋白质的分离。还可以用于延长药效。蛋白质的两性解离与等电点动物生物化学举例：如普通胰岛素等电点为5.3，注入体内呈负电性。同性电荷的相斥作用，使其在体内分散快，4-6小时后逐渐在肝肾经酶分解而灭活，只能维持6-8小时的作用。二、蛋白质的等电点蛋白质的两性解离与等电点动物生物化学举例：将普通胰岛素与碱性的鱼精蛋白混合后，其等电点上升到7.4，再将此混合物注入体内，由于其等电点与内环境pH一致，所以分子所带正负电荷相等。由于此时溶解度最低，被灭活的时间大大延长，可以维持药效24-36小时。二、蛋白质的等电点蛋白质分子在等电点时净电荷为零，容易碰撞而聚集沉淀，因此可以利用这一性质分离不同的蛋白质，这种方法称等电点沉淀法。电泳：在直流电场中，带电颗粒向着与其所带电荷相反的电极方向移动的现象称为电泳（electrophoresis）。蛋白质双向电泳银（硝酸银）染结果考马斯亮染色为蓝色蛋白质的胶体性质动物生物化学蛋白质属于生物大分子之一，其分子的直径可达1～100nm，为胶粒范围之内，是胶体溶液，具有不能通过半透膜的性质。*蛋白质胶体稳定的因素颗粒表面电荷水化膜动物生物化学二、亲水胶体蛋白质主要是指球状蛋白质有亲水面，它的亲水基团都在表面，因此与水有很大的亲和力，成为亲水胶体。蛋白质的胶体性质动物生物化学蛋白质的亲水胶体溶液是相当稳定的，一方面由于蛋白质表面的亲水基团，如氨基、羧基、羟基等会吸引它周围的水分子，使水分子定向排列在它的周围，形成“水化膜”。另一方面由于蛋白质在非等电点时带有同种电荷，同种电荷相斥，也使蛋白质分子保持一定的距离而不会聚合。二、亲水胶体蛋白质的胶体性质动物生物化学水化膜+++++++带正电荷的蛋白质－－－－－－－－带负电荷的蛋白质在等电点的蛋白质++++++++带正电荷的蛋白质－－－－－－－－带负电荷的蛋白质不稳定的蛋白质颗粒酸碱酸碱酸碱脱水作用脱水作用脱水作用溶液中蛋白质的聚沉蛋白质的胶体性质动物生物化学一、透析利用蛋白质的胶体特性在制备蛋白质的过程中，可将蛋白质中所含的可以透过半透膜的低分子杂质（如盐类）分离，这种分离方法成为透析。蛋白质的胶体性质由于受某些物理或化学因素的影响，蛋白质从溶液中析出，这种现象就称为蛋白质的沉淀（pricipitation）。沉淀和变性的概念是不同的。变性的蛋白质溶解度明显降低、易易结絮、凝固而沉淀；但是沉淀的蛋白质却不一定变性。蛋白质的沉淀1、盐析法蛋白质没有变性，水解后沉淀会消失，蛋白质又恢复活性。用于蛋白质分离制备。蛋白质硫酸铵蛋白质沉淀用高浓度中性盐：硫酸铵（NH4)2SO4、硫酸钠Na2SO4、氯化钠NaCl蛋白质的沉淀2、有机溶剂沉淀法高温会变性，低温不会。蛋白质酒精蛋白质沉淀用有机溶剂：丙酮、乙醇破坏蛋白质水膜蛋白质的沉淀3、生物碱沉淀法应用：在临床检验中，除去血液中的干扰蛋白质蛋白质浓硝酸蛋白盐沉淀蛋白质已经失去活性用硝酸、苦味酸、三氯乙酸、目酸、钨酸蛋白质的沉淀4、重金属盐沉淀重金属盐：铜Cu2+、汞Hg2+、银Ag+、铅Pb2+应用：重金属盐中毒的解毒蛋白质铜离子蛋白盐沉淀蛋白质已经失去活性蛋白质的沉淀5、加热沉淀将PH处于等电点附近的蛋白质溶液加热应用：煮熟的鸡蛋蛋白质加热蛋白质变性