重组和转座32课件.pptVIP

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重组和转座;第一节重组的分类;二、位点特异性重组;三、转座:;四、模板选择(copychoice)性重组;第二节同源重组;第三节转座(transposition)

一、原核转座子的类型;InsertionsequenceshaveinvertedterminalrepeatsandgeneratedirectrepeatsofflankingDNAatthetargetsite.

;?2.复合转座子(Compositetransposons):

含有一个中心序列和位于两侧的臂(arm);

除了和自身转座有关的基因外,中心序列含有抗药性基因等遗传信息;

复合转座子两端的臂由IS序列组成。;Acompositetransposonhasacentralregioncarryingmarkers(suchasdrugresistance)flankedbyISmodules.;3.TnA家族:;二.转座机制:

根据转座子的机制,转座可分成三种不同的类型;?2.非复制型转座(nonreplicativetransposition)

? Nonreplicativetranspositionallowsatransposontomoveasaphysicalentityfromadonortoarecipientsite.Thisleavesabreakatthedonorsite,whichislethalunlessitcanberepaired.

;?3.保守转座(conservativetransposition)

Conservativetranspositioninvolvesdirectmovementwithnolossofnucleotidebonds

? ;;1.非复制转座:

转座子插入到DNA上新的位点,首先交错切开靶DNA,再将转座子连接到靶DNA的凸出单链上,最后填补空缺完成转座。

???;复制型转座:

在转座子和靶位点两端分别交错切割产生切口;

转座子和靶位点的切口末端交互连接(a-f,g-d),形成一种交换结构(crossstructure);

以游离的3’末端作为引物进行复制,产生一个包含两个正向重复的转座子拷贝的复合物,称为共合体(cointegrate),这一过程在转座酶作用下进行;;转座子的两个拷贝在res(siteofresolution)位点发生重组,释放两个复制子。这一过程称为拆分(Resolution),在解离酶的作用下进行。

;;第四节真核生物的转座因子;

若玉米带有野生型C基因,则胚乳呈紫色;

C基因的突变阻断了紫色素的合成,那么胚乳呈白色;

在胚乳发育的过程中,突变发生回复导致斑点的产生,回复突变发生在早期发育阶段,紫斑就比较大;

McClintock推测原来的C突变(无色素)是由一个“可移动的控制因子”引起的,称解离因子(dissociator,Ds),它可以插入到C基因中(即转座)。

另一个可移动的控制因子是激活因子(activator??Ac),它的存在可激活Ds转座,进入C基因或其他基因,也能使Ds从基因中转出,使突变基因产生“回复突变”,这就是Ac-Ds系统;“Wearesadlyignorantoftheorganizationofthechromosomeandofthepossibletypesofchangesinthisthatmayoccurtothechromosomeasawholeoratthelocuslevel”.

BarbaraMcClintock

“…thatwashardlypossiblebeforethescienceofmolecularbiologycaughtupwithMcClintock”

JoshuaLederberg

(1925-2008,1958nobelLaureate)

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