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临床微生物技术（一）-细菌检验的基本技术
供基础医学专业学生
[实验类型]基本实验方法
[目的要求]
1.掌握细菌基础培养基制备所需器材的准备和灭菌
2.掌握细菌基础培养基制备的方法和技巧
3.掌握在各种细菌培养基上的细菌接种方法
1.肉膏汤（液体培养基）：2ml/支根据培养基说明进行配制
例如：营养肉汤粉末（含牛肉浸膏+蛋白胨+NaCl）+去离子水加热熔化，配制成1.8%的溶液调节pH7.4-7.6分装，高压蒸汽灭菌，冷却。
2.半固体培养基：2ml/支
肉膏汤+0.1%～0.5%琼脂（0.3%）分装灭菌
3.琼脂斜面培养基：3ml/支
肉膏汤+2%琼脂分装灭菌后倾斜待凝
4.普通琼脂平板：10ml/板
肉膏汤+2%琼脂消毒灭菌，用时倾倒
一、制备肉膏汤、半固体、琼脂斜面、普通平板
“1.8%”为质量体积百分比，表示100ml水中加入1.8g肉汤粉末。添加量根据实际配制量进行计算，如要配制500ml液体培养基需加粉末9g。
[分组]4-6人/组
备注：每组做一种培养基,计算所需用量。
每人需肉膏汤培养基，
半固体培养基各1支（2ml），
普通琼脂斜面1支（3ml），
普通琼脂平板（10ml），用于后续实验时倾倒
培养基
每只用量（ml）
人数（人）
用量（ml）
准备量
液体培养基总准备量
液体培养基
2
17
34
50
400*
半固体培养基
2
17
34
50*
/
斜面培养基
3
17
51
70*
/
固体培养基
10
17
170
200*
/
*制备培养基，添加琼脂的量要按照准备量来进行计算。
二、细菌培养基上的细菌接种方法
1.看录像：细菌的人工接种（复习）。
2.细菌接种:菌种为--大肠杆菌，枯草杆菌。
（1）普通琼脂平板
（2）琼脂斜面
（3）半固体培养基
（4）液体培养基
3.需氧培养法35-37℃，18-24h
作业
1.记录培养基的制备过程
2.记录接种方法
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