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屏障环境实验人员的工作流程
一、实验人员、实验动物及实验用品进出屏障实验室步骤
1.实验人员进出屏障系统操作规范
(1)动物实验人员进出屏障系统:外部区域→门禁机→门厅→登记(脱外套、
鞋、首饰品等,把要带入的仪器放入传递窗、喷雾、开紫外线灯)→进入→更用
消毒液洗手→二更(先用75%乙醇自动喷手消毒,戴口罩,穿无菌衣、鞋套,再
戴好灭菌手套,把无菌包扔到一更,再用75%乙醇自动喷手消毒)→风淋(120秒)
→内准备室→动物实验室或饲养室(完毕,清理桌面、地面)→污物走廊→非洁净
区→门厅换回自己的衣服。
(2)进入门厅并脱去外套,将个人衣物存放在衣柜内。
(3)通过门禁机进入门厅,填写屏障实验室进出登记,在一更内脱去较厚的
衣服,浸泡双手进行消毒,进入二更,用75%乙醇自动喷手消毒,然后按顺序
戴上口罩,穿无菌工作服、鞋套,戴手套,进入风淋室风淋120秒(风淋时不停
转动身体),进入洁净区、准备室、清洁走廊。如果灭菌衣物要补充,工作人员
必须先去洁净区准备间取灭菌衣物放在二更传递窗内,以便下次使用。然后再到
洁净准备间去取当天工作所需要的物品进入实验室工作。
(4)工作完毕后把废弃物、用过的用具和笼具一同整理,打扫内部环境卫生,
最后将所有废弃物推出到污物走廊。工作人员把废弃物推入缓冲间后再推出屏障
外,然后到门厅去换回自己的衣服。把穿过的工作服拿去清洗、晒干,供下次消
毒用。
(5)在屏障系统内,实验人员进出时不能同时开启两扇门,并做到随手关门;
不能逆向进入风淋室和二更;人一旦进入污物走廊后,即不得返回饲养室。
2.动物进出屏障系统操作规范
(1)自产动物:根据屏障设施动物实验区和生产区的具体布局情况,传入方
式有两种:一种是直接经生产区与实验区之间的内传递窗传入;另一种是经实验
区的传递窗传入。
1)自产动物(带饲养笼盒)→内传递窗→直接进入实验室饲育区→(实验后)→
(经包装)污物走廊→外部区域。
2)自产动物(带运输盒)→传递窗→直接进入实验室饲育区→(实验后)→(经包
装)污物走廊→外部区域。
(2)引进动物:从外单位引进的实验动物应当注意的注意事项:①动物来源
单位的生产设施等级不能低于使用单位;②购买动物时,应当向生产单位索取动
物检疫合格证;③转运动物的运输盒必须保持完整不破损,并且具备相应的等级。
外购必须经过传递窗传入。传递动物时必须由两个人完成,一个人在洁净准
备间,另一个在屏障外,在屏障外的人确认传递仓对侧门关闭时,才能打开进口,
用2%过氧乙酸喷运输盒的外表面一下,放进传递仓,再用2%过氧乙酸喷一下,
关闭进口并开启紫外线灯,15分钟后由在洁净准备间的人打开内口,在传递仓
内开启运输盒并把动物移到预先准备好的灭菌饲养盒里,运输盒留在传递仓内,
关闭传递仓内口,此时饲养员把动物送入隔离检疫室饲养一段时间(一般为1周),
观察健康正常后送入饲养室饲养或实验室做实验。
3.物品进出屏障系统管理规范
(1)物品流向:包装→高压灭菌消毒、传递窗、渡槽→清洁准备室→动物实
验室或饲养室→(污物经包装处理)污物走廊→外部区域。
(2)不同实验物品进入屏障系统的规程
1)耐高压类:屏障内使用的全部鼠盒、水瓶、饲料、垫料、衣服、纸张等耐
高压物品都必须经过双扉预真空高压灭菌器灭菌后方可进入屏障内。
2)不耐高压类:不耐高压类物品必须经过传递仓(缓冲间)传入屏障内。在屏
障外确认传递仓对侧门关闭时,打开进口,把欲传入物品的外表面用2%过氧乙
酸喷雾擦拭,然后放进传递仓,再用2%过氧乙酸对传递窗内部进行喷雾消毒,
关闭进口并开启紫外线灯,30分钟后由在洁净准备间的人打开内门,取出物品
并关闭内门。
3)耐浸泡类:有些耐液体浸泡但不耐高压的物品,可以采取消毒液长时间浸
泡,再放入传递窗传入。
更换下来的脏鼠盒、饮水瓶等物品通过污物走廊、缓冲间运出屏障外,送到
洗刷消毒室,清洗晾干后待消毒。使用后的废弃物品,从污物走廊传出后无害化
处理。待清洗消毒的实验器械,从污物走廊传出或带出。
二、动物实验准备工作
计划好当日工作内容,取足当天所需物品、实验器械、饲料、饮用水等,根
据人员物品单向流动的原则一次性移入实验室。
三、实验期间注意事项
1.进入实验室后,关闭紫外线灯,确认实验室有无异常,包括室内温度、
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