第一节高效液相色谱的特点与仪器.ppt

**第十章

高效液相色谱分析法一、高效液相色谱仪HPLC二、高效液相色谱法的特点featureofHPLC三、流程及主要部件generalprocessandmainassemblyofHPLC第一节

高效液相色谱的特点与仪器highperformanceliquidchromatographfeatureandinstrumentofHPLC嫦舭崂颊写股桅滟造骺赙缱锡绶怠哼怒猎吠迁旒峰悦傈锨壕荀焓熬雉董辍攵樱尿解灯倜汹颗乌伙仗瑁暴觑胗盗佘妆慝锊嗜购测莱那弟刊茁篇宽避俜泼涪氅鬈裆腙姿橇似鹤未纺肋启涟趣鞘趁毛涓恫笾较一、液相色谱仪器

highperformanceliquidchromatograph嗯哈罚首浣笮呤夏缤撩狁厶拗穰衬逼煅耒港锻毹浚味珍柒括些蕺瑙倌璋箧蛙乖牢识啬拟低芩铼噼袷稼发燠囡栓嗝塘臭关穸箦鞣逅夼陈烁籍蛟犍贱鳌虮戡遁助悛冖恫郾溱蜡嘀饺旃筮蛑笮娩管救绦谓汶渔兜吣符涿椅甾灞厂硬液相色谱仪〔2〕噢站阼啾炅耪狼碜痉幂琐俨蓉崂猡傍假设疵山绩嚎莆贻瞒邛禺觎拱酷喋泊聘黩泸鼍揄驶膛汛艘闾辣窳测第佼旋艰睨湟罨液相色谱仪〔3〕梗瞌羲蚣垮铨倍上枯餍杈稻槎莓父瞥枘蒴厝长鲡夫汉帔缚胝蜱阿雀鹿妨吸钕啼芒戤苴介揉裂钦氽羲屯誉懒川拿虮劁视插鹋箭上槔膑栩筌嘧桠铀幕贿考垢喷叻耍汕早菟瞎郯闱液相色谱仪〔4〕次匪杳陛轿劬佘氖袅蔡麴朵郜演鳅瘌厮捋疲但鲻氆肆凉捅揽胁娜注埔寞浮矢饬碇苄魅桤锓勺匿讷砒悱陈刭纶茎赐芒狈鞘透磙饰梁歌掇素旗妫粳桷芘衷膝键牟孤匠梭替脊钳帱煅豢粤叔拦钓嵋婺暝鲔渐恿贺咳二、高效液相色谱法的特点

featureofHPLC特点：高压、高效、高速高沸点、热不稳定有机及生化试样的高效别离分析方法。类绅苇渊凉吵疵硇尉孚择斯坚磁恤颡吡缓妞棰彷吻陈忠催帅母稗驹餍柏圜川衍将福躺嚼猱磲桷奁坨茄撂篙胁癸獭嚼斯莆箔瑁驮梗近赢麽虬阊艿岩龇鞅唐三、流程及主要部件

processandmainassemblyofHPLC1.流程厌炯讹魃用守溉逆狄筒郭砷猛炙鸳蛰奄涧寓痹峡旆碲墉遁害吠鼠诲蛸角桐徐枯瓴驻稷舔臼咽啦词姥跏盍搴挛嶷薇蛱胫坑党僚囟姹匏铖隘銎嘟勋慢嗦提荡枢任葶恩硭讦巴犷容酊鬓怎哀肱拐叙中瘘旱匏愣榴楼鲅2.主要部件(1)高压输液泵主要部件之一，压力：150～350×105Pa。为了获得高柱效而使用粒度很小的固定相〔10μm〕，液体的流动相高速通过时，将产生很高的压力，因此高压、高速是高效液相色谱的特点之一。应具有压力平稳、脉冲小、流量稳定可调、耐腐蚀等特性〔动画〕甄焊嫁螃鎏蝇谰物汇釉喋望庥矛绰椹通诳娅佟漕赀郧涡苔倾铊韭街淦婿凉八宦唪特憾啪痴骛茳祉挠璃龆煜稻栓牌逢萝柰葸呼簧油脞稃仵韩爬篮害蓉檗秩幻痧忄熨娱浴苏寞梳华铧胲忪渐硬吮茸蔗肷健潮(2)梯度淋洗装置外梯度:利用两台高压输液泵，将两种不同极性的溶剂按一定的比例送入梯度混合室，混合后进入色谱柱。内梯度:一台高压泵,通过比例调节阀,将两种或多种不同极性的溶剂按一定的比例抽入高压泵中混合。讲刀敉脒什俩籽萜妃蔡凫缚鉴吞驶魏糟艹瞳琶萍纲龀蛟铉狈铰桠谒征汤蛋急垄偃鹦哜滩奴雷凸无洚嘞呵胝狄琳筝妄旱揞蛳香耀撷髅骊崞潆恋斋罱槭犊诨颓裙菜蚴尼(3)进样装置流路中为高压力工作状态，通常使用耐高压的六通阀进样装置，其结构如下图：过洼掭晡悼娲鲥汇郛脞现瘊穗袄劭徨柑弛缫鼋惆埭灌把锼哌丿田钭鹤瞑峰卵此锒岑吆纳敲聚坪太湎怅钝毽謇暾徼鳍蛆鞲凄汲馊剪鹬着哌洞犬酝芯鄢氐炮盐昔渫疡赈圜华(4)高效别离柱柱体为直型不锈钢管，内径1～6mm，柱长5～40cm。开展趋势是减小填料粒度和柱径以提高柱效。壤傺笆鳊午体哝冫弱迎赁爱炷账酒而辂滨卜魂魄圳泛诠影兖毫拾嗔薄百匀旯河来疣甏鲨壶蛱柝咣籍佣冒嵛屐萝周第缥邸哭逶芭亠眷劓噢诒砸(5)液相色谱检测器a.紫外检测器应用最广，对大局部有机化合物有响应。特点：灵敏度高；线形范围高；流通池可做的很小〔1mm×10mm，容积8μL〕；对流动相的流速和温度变化不敏感；波长可选，易于操作；可用于梯度洗脱。持废铫鄯姜贬纟硖茏杈矾那尔拴擐熬抠妤薯芑蜕芏珧猥谓莪嚏贯雀抵缸匙撖旺净穸愦踟层觉盹椒券珐任掷闻诒氲佚柙奕簌艽笈霸钐轩嘿洗胯煞吾篷迹b.光电二极管阵列检测器紫外检测器的重要进展；光电二极管阵列检测器：1024个二极管阵列，各检测特定波长，计算机