【生物课件】重组DNA技术的基本工具(含DNA粗提取) 2022-2023学年高二人教版（2019）选择性必修3.pptxVIP

;是指按照人们的愿望，通过转基因等技术，赋予生物新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。从技术操作层面看，由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫作重组DNA技术。;人的胰岛素基因能通过拼接并在受体细胞大肠杆菌中表达出相同蛋白质--胰岛素的理论基础是？

（1）大肠杆菌和人的遗传物质都是。

（2）不同生物的DNA分子能够拼接在一起，原因是。

（3）同一种基因在不同生物体内表达出来的蛋白质相同，因为。

（4）遗传信息的传递都遵循。;第3章基因工程;为了棉花姓“中国”;从社会中来;3.1重组DNA技术的基本工具;1.来源：从微生物（主要是原核生物）体内分离出来

2.功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。

3.作用部位：磷酸二酯键，限制酶只切割两个核苷酸之间的磷酸二酯键

4.切割结果：切口有两种：黏性末端和平末端;你能根据所掌握的知识，推测限制酶存在于原核生物中的主要作用是什么吗？;思考讨论1：仔细观察以下四种限制酶识别的特定序列有何特点？;写出下列限制酶切割形成的黏性末端;—GGG

—CCC

;15;;DNA连接酶——“分子缝合针”;;与DNA相关的五种酶的比较;基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”;基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”;;基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”;;2.实验原理：;3.方法步骤;5.方法步骤;方法步骤（视频）;注意事项;刑侦破案;1.你提取出白色丝状物或沉淀物了吗？用二苯胺试剂鉴定的结果如何？

2.你能分析出粗提取的DNA中可能含有哪些杂质吗？

3.与其他同学提取的DNA进行比较，看看实验结果有何不同，分析产生差异的原因。;进一步探究;练习与应用;练习与应用;2.有2个不同来源的DNA片段A和B，A片段用限制酶SpeI进行切割，B片段分别用限制酶HindⅢ、XbaI、EcoRV和XhoI进行切割。各限制酶的识别序列和切割位点如下。;2.有2个不同来源的DNA片段A和B，A片段用限制酶SpeI进行切割，B片段分别用限制酶HindⅢ、XbaI、EcoRV和XhoI进行切割。各限制酶的识别序列和切割位点如下。;用限制酶切割时需注意的事项

(1)获取目的基因和切割载体时,通常使用同种限制酶,目的是。但是使用该法缺点是容易发生，为了避免上述情况发生，可采取的措施是。

(2)获取一个目的基因需限制酶切割次,共产生个游离的磷酸基团。

(3)选择限制酶切割位点的基本原则：

①切割目的基因时：。

②切割质粒时：。;【例】①用图1中的质粒和图2中的外源DNA构建重组

质粒，不能使用SmaⅠ切割，原因是

。

②构建重组质粒时，最好选择限制酶BamHⅠ、HindⅢ处理质粒、外源DNA，这样做的目的是。;如图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线;基础知识提问