关于利巴韦林颗粒微生物限度检查方法的研究彭正英.doc

关于利巴韦林颗粒微生物限度检查方法的研究彭正英

目录

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正文 2

文1：关于利巴韦林颗粒微生物限度检查方法的研究彭正英 2

2实验材料 2

2.1实验材料 2

2.1.1样品 2

2.1.2验证试验菌种 3

2.1.3试剂培养基 3

2.1.4实验器材与用具 3

3实验方法与步骤 3

3.1溶液制备 3

3.1.1pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液（稀释液）制备： 3

3.1.20.9%无菌氯化钠的制备： 3

3.1.3供试品溶液的制备 4

3.1.4菌液制备 4

3.2需氧菌总数 4

3.2.1试验组 4

3.2.2菌液对照组 4

3.2.3供试品对照组 4

3.2.4取上述3组溶液各1ml 4

3.2.5结果判断 5

3.4控制菌(大肠埃希菌)检查方法验证 5

3.4.1试验组 5

3.4.2阴性对照组 5

3.4.3阳性对照组 5

3.4.4检查 6

3.4.5结果判断 6

4结果与分析 6

5结论 6

文2：吡咯类抗真菌药物制剂微生物限度检查方法的研究 7

1试药与仪器 8

1.1试药 8

1.2仪器 8

2方法与结果 9

2.1药典附录收载方法试验的结果 9

2.2回收率测定 9

2.3不同配方稀释剂与冲洗液的效果比较 9

2.4.1根据上述试验结果建立方法取供试品10g 10

2.4.2控制菌检查 10

2.4.3无菌组氨酸－卵磷脂－聚山梨酯80混合溶液配 11

2.5验证试验 11

2.5.1细菌计数 11

2.5.2控制菌检查方法的验证试验组 12

原创性声明（模板） 13

正文

关于利巴韦林颗粒微生物限度检查方法的研究彭正英

文1：关于利巴韦林颗粒微生物限度检查方法的研究彭正英

1引言

2015年版《中国药典》于2015年12月01日实施，微生物限度检验方法发生了重大的变化，充分借鉴美国药典、欧洲药典等成熟经验，从操作洁净区环境，计数方法、培养基种类，判断标准，方法学验证等方面做出了修订。为了确保该方法在实验室适应性。应对适用此方法的药品进行方法验证。

2实验材料

2.1实验材料

2.1.1样品

利巴韦林颗粒。

2.1.2验证试验菌种

铜绿假单胞菌，大肠埃希菌，枯草芽孢杆菌，金黄色葡萄球菌，白色念珠菌，黑曲霉。

2.1.3试剂培养基

无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液（pH7.0），0.9%无菌氯化钠溶液，胰酪大豆胨琼脂培养基、沙氏葡萄糖琼脂培养基、胰酪大豆胨液体培养基、麦康凯液体培养基、麦康凯固体培养基

2.1.4实验器材与用具

万分之一电子天平、高压灭菌锅、电热恒温鼓风干燥箱、洁净操作台、隔水式恒温培养箱、生化培养箱等。

3实验方法与步骤

3.1溶液制备

3.1.1pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液（稀释液）制备：

取磷酸二氢钾3.56g，无水磷酸氢二钠5.77g，氯化钠4.30g，蛋白胨l.00g，加水1000ml，微温溶解，滤清，分装，灭菌。

3.1.20.9%无菌氯化钠的制备：

称取9g氯化钠，加水1000ml溶解后，湿热灭菌。

3.1.3供试品溶液的制备

称取样品10g，加入无菌PH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液100ml，振摇使分散均匀制成1：10均匀的供试品溶液。

3.1.4菌液制备

临用前，将1.1ml0.9%无菌氯化钠中加入各种定量菌株瓶中(每颗含500-1000cfu)，盖上瓶盖，静置约30s，漩涡震荡5-10s，即得。

3.2需氧菌总数

2需氧菌总数、霉菌与酵母菌总数计数方法验证(平皿法之倾注法)

3.2.1试验组

2.1试验组：取供试品溶液9.9ml五份，至试管中，分别加入金黄色葡萄球菌，铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌，白色念珠菌、黑曲霉试验菌液0.1ml

3.2.2菌液对照组

2.2菌液对照组：取:稀释液替代供试品溶液，按试验组操作

3.2.3供试品对照组

2.3供试品对照组：取制好的供试品溶液，以稀释液代替菌液同试验组操作

3.2.4取上述3组溶液各1ml

2.4取上述3组溶液各1ml，置直径90mm的无菌平皿中，注入15-20ml温度不超过45℃的相应培养基中，混匀，凝固，将金黄色葡萄球菌，铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、黑曲霉置于胰酪大豆胨琼脂培养基中，在30-35℃培养不超过3天；将白色念珠菌、黑曲霉置于沙氏葡萄糖琼脂培养基，在20-25℃培养不超过5天。每种菌株每种培养基至少制备2个平皿，以算术均值作为计数结果。

3.2.5结果判断

2.5结果判断：试验组菌落数减去供试品对照组菌落数