二级菌种和三级菌种的制备.ppt

●二级菌种的接种把试管菌种接入二级菌种培养料中的过程称为二级菌种接种。二级种要求纯度高、质量好。第52页，讲稿共118页，2023年5月2日，星期三●二级菌种的接种﹡接种前的准备﹡二级菌种的接种第53页，讲稿共118页，2023年5月2日，星期三﹡接种前的准备1.一级种选择：选择种性纯正，健壮、浓密、整齐的一级种。2.接种箱(室)消毒：用84喷洒后再开紫外灯20min。用酒精棉球擦管（瓶）外面，管口、瓶口和棉塞都要在火焰上烘烤。第54页，讲稿共118页，2023年5月2日，星期三一点接种切取2㎝菌种，迅速送入菌种瓶内的接种穴上，立即封口。每支一级菌种可接5～8瓶二级种。第55页，讲稿共118页，2023年5月2日，星期三两点接种先在接种穴内放一块菌种，后在接种穴口上放一块菌种。每支斜面菌种可接二级菌种3～5瓶。第56页，讲稿共118页，2023年5月2日，星期三接种箱、超净台第57页，讲稿共118页，2023年5月2日，星期三接种箱、超净台第58页，讲稿共118页，2023年5月2日，星期三接种箱、超净台第59页，讲稿共118页，2023年5月2日，星期三第60页，讲稿共118页，2023年5月2日，星期三●三级菌种的接种把二级菌种接入三级菌种培养料中的过程称为三级菌种接种。三级菌种用玻璃瓶或塑料袋生产。第61页，讲稿共118页，2023年5月2日，星期三●三级菌种的接种﹡接种前的准备﹡三级菌种的接种﹡塑料袋接种﹡几种简易的接种方法第62页，讲稿共118页，2023年5月2日，星期三﹡接种前的准备把所需物品搬入接种箱(室)中，将二级种横置于接种架上，待接种的料瓶(袋)卧放。然后对接种场所进行消毒处理。第63页，讲稿共118页，2023年5月2日，星期三﹡三级菌种的接种用酒精棉球擦拭瓶外壁，以火焰瓶口。夹取燃着的酒精棉球，烧灼二级种瓶口、瓶颈内壁，进行瓶口消毒。用灼烧后的镊子扒去老菌皮，捣碎菌料，火焰封口，放在接种瓶架上。第64页，讲稿共118页，2023年5月2日，星期三单人操作时，左手执料瓶，右手拔去棉塞用小指和手掌夹住，掀起封口纸一个小角。右手执接种工具，灼烧后，取2㎝大小原种块。迅速投入料瓶内。一般每瓶二级种可接40～80瓶三级种。第65页，讲稿共118页，2023年5月2日，星期三﹡三级菌种的接种第66页，讲稿共118页，2023年5月2日，星期三第67页，讲稿共118页，2023年5月2日，星期三﹡塑料袋接种由于塑料袋质软，袋口不能直立，又不能接近火焰，操作不不埂。最好在无菌条件较好的接种箱(帐)内接种。接种时采用单人或双人操作法进行接种。第68页，讲稿共118页，2023年5月2日，星期三第69页，讲稿共118页，2023年5月2日，星期三﹡几种简易的接种方法1.蒸气接种法2.电炉接种法3.扇形多头酒精灯接种法第70页，讲稿共118页，2023年5月2日，星期三1.蒸气接种法⑴原理⑵方法第71页，讲稿共118页，2023年5月2日，星期三⑴原理需要小接种室和一套蒸气发生器。电炉上放一铝锅，作为蒸气发生器，在锅盖中央挖一个直径10厘米的圆孔，蒸气在圆孔内集中向外扩散，把含有杂菌的空气排开，形成无菌区。第72页，讲稿共118页，2023年5月2日，星期三第73页，讲稿共118页，2023年5月2日，星期三⑵方法接种前，向空中喷水，使空中孢子随水滴沉降。将培养料趁热搬进接种室，待料温降至30℃以下时开始接种。在此之前将水烧开，把接种工具等放入水中煮沸15分钟、然后即可接种。第74页，讲稿共118页，2023年5月2日，星期三两人配合，一人左手握菌种瓶(或管)，右手拿接种工具，负责将菌种接入待接的瓶、袋内，另一人将待接的瓶、袋开塞或开口，接入菌种后立即封口。菌种瓶口、接种工具，待接瓶口(或袋口)及棉塞，不得离开蒸气，以免感染杂菌。瓶口要稍向下倾斜。两人接种，一次可接500～800瓶。第75页，讲稿共118页，2023年5月2日，星期三2.电炉接种法800～1000瓦电炉，用薄铁皮做一个内径30～50㎝，高40～60㎝的圆筒，罩在电炉外即成。这样热流集中于筒顶口形成一个无菌区，其范围和热力远远超过酒精灯火焰。一套设备可供3～4人同时操作。操作时，尽可能缩短时间，以避免烫死菌丝。第76页，讲稿共118页，20