十滴水软胶囊中樟脑的含量测定.docx

实训二十六十滴水软胶囊中樟脑的含量测定

一、 实训目的

掌握气相色谱法的一般操作步骤和技能

理解内标法的测定原理

了解气相色谱法含量测定的设计思路。

二、 测定依据

十滴水软胶囊药品标准［《中国药典》2005年版（一部）正文部分301页］

【处方】樟脑62.5g干姜62.5g大黄50g小茴香25g肉桂25g辣椒12.5g桉油31.25ml

【含量测定】照气相色谱法（附录丑E）测定。

为10%,柱温150。以理论板数按樟脑峰计算应不低于2000,樟脑峰与薄荷脑峰的分离度应大于2。

校正因子测定精密称取樟脑对照品50mg，置10ml量瓶中，精密加入薄荷脑50mg，加无水乙醇至刻度，摇匀，取1?2M,注入气相色谱仪，计算校正因子。

测定法取本品装量差异项下的内容物，混匀，取约0.8g，精密称定，置具塞试管中，用无水乙醇提取5次，每次4ml，分取乙醇提取液，合并，转移至25ml量瓶中，精密加入薄荷脑125mg，使溶解，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。取1?2M，注入气相色谱仪，测定，即得。

本品每粒含樟脑（C10H16O）不得少于53mg。

气相色谱法［《中国药典》2005年版（一部）附录丑E］

三、 测定原理

十滴水软胶囊由樟脑、干姜、大黄、小茴香、肉桂、辣椒、桉油等七味中药制成，樟脑为其君药，具有升华性。故《中国药典》采用气相色谱法，以樟脑为对照品、薄荷脑为内标物，用内标法测定其含量，并规定本品每粒含樟脑

（C10H16O）不得少于53mg。以此控制药品质量的优劣。

樟脑和薄荷脑属于单萜含氧衍生物（图5-39、图5-40）。二者结构和性质相似，均具有挥发性。难溶于水，溶于乙醇、乙醚、三氯甲烷和苯，故用无水乙醇从样品中提取樟脑；配制校正因子测量用的对照溶液以及供试品溶液。薄荷

脑不存在于样品中，且分子量和极性与樟脑略有差异，在本色谱条件下二者的色谱峰接近但不重叠，所以选用薄荷脑为内标物。

OH

图5-39樟脑结构式 图5-40薄荷脑结构式

因采用内标法测定，进样时仅规定了进样量的范围1?2M,未规定准确的进样体积，这并不影响测量的准确性。

测定原理：根据樟脑的溶解性能，用适当溶剂将其提取出来，再加入一定量薄荷脑内标物制成供试品溶液。根据樟脑色谱峰峰面积或峰高与其浓度或质量在一定范围内成线性关系的规律，将供试品溶液注入气相色谱仪，测定樟脑和薄荷脑色谱峰峰面积或峰高，并结合校正因子以及其他定量参数，即可求算出药品中樟脑的含量。

四、 仪器与试剂

气相色谱仪、10ml微量注射器、分析天平（感量0.0001g、0.00001g）、具塞试管、量筒、25ml量瓶、10ml量瓶等

无水乙醇、樟脑对照品、薄荷脑对照品（内标物质）等。

五、 实验步骤与内容

供试品溶液制备取本品装量差异项下的油状内容物，混匀，用吸管吸取约0.8g，置10ml具塞试管中，用分析天平（感量0.0001g）精密称定，称量范围0.7200?0.8800g。用量筒量取无水乙醇4ml加至试管中，密塞，摇匀，放置，小心将上清液倾到至25ml量瓶中，再按上法提取4次。用分析天平（感量0.0001g）精密称定薄荷脑对照品（内标物）125mg，称量范围0.1246?0.1254g，加入量瓶，摇匀使溶解。加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

校正因子测量用对照溶液的制备用分析天平（感量0.00001g）分别精密称取樟脑对照品和薄荷脑对照品（内标物）各50mg，称量范围0.04950?0.05050g，置10ml量瓶中。加无水乙醇至刻度，摇匀，即得。

色谱条件与系统适用性试验以聚乙二醇（PEG）-20W为固定相，涂布浓度为10%，柱温150。以系统适用性试验按高效液相色谱法（《中国药典》附录丑D）项下规定进行，其中理论板数按樟脑峰计算应不低于2000，樟脑峰与薄荷脑峰的分离度应大于2。重复性、拖尾因子的测定结果应符合有关规定。

校正因子测定使用10ml微量注射器或自动进样器，取1?2M校正因子测量用对照溶液，注入气相色谱仪，记录色谱图。根据对照品樟脑和内标物薄荷脑的保留时间（在系统适应性试验中测得），确定该色谱图中对照品樟脑和内标物薄荷脑的色谱峰，并测量二者的峰面积或峰高。按下式计算校正因子（f）。

f=

人对/C对

式中：A内为内标物薄荷脑的峰面积（峰高）；

A对为对照品樟脑的峰面积（峰高）；

C内为内标物薄荷脑的浓度；

C对为对照品樟脑的浓度。

供试品测定使用10ml微量注射器或自动进样器，取1?2闫供试品溶液，注入气相色谱仪，记录色谱图。根据对照品樟脑和内标物薄荷脑的保留时间（在系统适应性试验中测得），确定该色谱图中待测组分樟脑和内标物薄荷脑的色谱峰，并测量二者的峰面