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关于实验原理及操作第1页，讲稿共18页，2023年5月2日，星期三一、实验目的了解和掌握免疫酶技术的测定原理。掌握酶联免疫吸附测定技术的操作步骤，学会利用竞争ELISA的方法，定量测定抗体或抗原。了解免疫酶技术在生物学和医学研究的重要意义及应用价值。第2页，讲稿共18页，2023年5月2日，星期三二、实验原理免疫标记技术（immunolabellingtechnique）:是指用荧光素、放射性同位素、酶、发光剂或电子致密物质等作为示踪剂，标记抗体或抗原进行的抗原抗体反应。特点：高度灵敏、特异、快速，定性、定量、定位分类：免疫酶技术、免疫荧光技术、放射免疫技术、免疫电镜技术、免疫胶体金技术和发光免疫测定。第3页，讲稿共18页，2023年5月2日，星期三免疫酶技术(enzymeimmunoassay)：是将抗原和抗体的特异性免疫反应与酶的催化反应相结合而建立的一种免疫检测技术。就是利用酶标记抗体或抗原，以检测相应抗原或抗体的一种免疫学标记技术。第4页，讲稿共18页，2023年5月2日，星期三酶联免疫吸附试验ELISA（enzymelinkedimmunosorbentassay）是一类常用的免疫酶技术。是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面，使抗原抗体反应在固相表面进行。常用的酶：辣根过氧化物酶(HRP)碱性磷酸酶（AP）。第5页，讲稿共18页，2023年5月2日，星期三ELISA检测抗原Ag+ Ab*?Ag-Ab*第6页，讲稿共18页，2023年5月2日，星期三ELISA检测抗体Ab+ Ag*?Ab-Ag*第7页，讲稿共18页，2023年5月2日，星期三ELISA检测抗体Ag+Ab1?Ag-Ab1Ag-Ab1+Ab2*?Ag-Ab1-Ab2*第8页，讲稿共18页，2023年5月2日，星期三第9页，讲稿共18页，2023年5月2日，星期三竞争ELISA检测
抗原第10页，讲稿共18页，2023年5月2日，星期三固定OD值第11页，讲稿共18页，2023年5月2日，星期三第12页，讲稿共18页，2023年5月2日，星期三实验材料：羊抗人血清白蛋白抗体（一抗）已知含量的人血清白蛋白（作标准曲线）待检人血清白蛋白辣根过氧化物酶标记的驴抗羊抗体（二抗）包被液CBS：PH9.6，0.05mol/L碳酸盐缓冲液洗板液或稀释液：PH7.4，0.01mol/LPBS底物溶液：OPD-H2O2终止液：2mol/LH2S04酶标反应板（一条/人）第13页，讲稿共18页，2023年5月2日，星期三
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