园艺植物栽培课件组织培养技术.pdf

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4愈伤组织的形成和植株再

成分再分化

熟化胚状体

细细

胞胞

愈伤组织

植物的再分化形式有两种,发生型和胚胎

发生型,在有些情况下,再分化可以直接发生于脱分

化的细胞中,无须经历愈伤组织阶段,但大多数情况

下,再分化过程是在愈伤组织细胞中发生的。

插条产生愈伤组织

由菊花叶片的愈伤组织分化出的小植株

4.1愈伤组织的形成

4.1.1愈伤组织形成的条件

◆离体:与植株分离,从其它组织与的抑制中解脱出来。

◆合适的培养条件:

大量研究表明,几乎所有高等植物的各种,如根、茎、

等,以及各种组织,如皮层、茎髓和形成层等,离体后

在适当条件下,都能产生愈伤组织。

愈伤组织诱导的成败关键主要不是外植体的来源和

种类,而是培养条件,其中激素的种类和浓度最为重要。

当然,外植体的类型和外植物体原来在植株上所处的位

置(反映了内源激素水平)对愈伤组织诱导的影响也不

能忽视。

4.1.2愈伤组织形成的过程

外植体中已分化的活细胞,在外源激素的诱导下通过脱

分化后形成愈伤组织,这一过程被大致划分为三个时期

➢诱导期

➢期

➢形成期

诱导期:细胞的准备期

☆诱导期是细胞准备进行的时期。接种的外植体材料的细胞

通常都是成熟细胞,处于静止状态,细胞大小没有多大变化,外

观无明显特征,但细胞内物质代谢旺盛,基等(1981)在

研究离体培养的油橄榄茎段时发现,细胞内合成代谢活跃,

RNA含量迅速增加,细胞核体积明显增大。

☆诱导期的长短,因植物种类和外植体的生理状况和外部因素

而异,如胡萝卜的诱导期要好几天,新鲜的菊芋块茎则只要

22h,但菊芋块茎经过5个月的贮藏后,诱导期则须延长到40h

以上。

期:细胞从开始到持续的时期

•期是指细胞通过一分为二的,不断增生子细胞的过

程。外植体的细胞一旦经过诱导,其外层细胞开始迅速,

期主要表现如下:

•1.细胞的数目迅速增加。如胡萝卜培养7天后,细胞数可增加10倍

•2.每个细胞平均鲜重下降。这是由于细胞鲜重的增加不如细胞数目

的增加快的缘故。

•3.细胞体积小,内无液泡,如同根尖和茎尖的分生组织细胞特性。

•4.细胞的核和核仁增大到最大。

•5.随着细胞不断和组织生长,细胞的总干重、蛋白质和含

量大大增加,新细胞壁的合成极快。

总之,期的愈伤组织的共同特

征是:细胞快,结构疏松,缺少有

组织的结构,维持其不分化的状态。

形成期:从愈伤组织到发生

•形成期是指外植体经过诱导期和期后形成了无序结

构的愈伤组织的时期。

•进入形成期后,细胞的平均大小相对稳定,不再减少,细

胞由原来局限在组织外缘的转为组

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